elisa试剂盒斑点elisa方法的首要操作程序为:
(1)载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加单调进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检查抗原适度稀释后参加圈中,置37℃使硝酸纤维素膜*单调。每张7cm×2.3cm的膜通常可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。
(2) 封闭 将硝酸纤维素膜置于封闭液中,37℃感作15-30分钟。封闭液多选用富含正常动物血清、ph7.2或ph7.4的pbs。
(3) 加被检血清 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再参加必定量适度稀释的待检血清,37℃反响必定时刻,用洗刷液洗三次,每次1-3分钟。洗刷液通常为必定浓度的pbs-tween溶液。
(4) 加酶标抗体,37℃反响必定时刻后,用洗刷液洗三次。
(5)显色参加新鲜制作的底物液,37℃反响必定时刻后,去掉底物液,加蒸馏水洗刷中止反响。
(6) 作用断定 以阳性、阴恶血清作为对照,膜片基地呈现深棕赤色斑驳者为阳性反响,否则为阴性反响。
elisa试剂盒斑点elisa(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)(dot-elisa(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)) 与惯例的微量板elisa(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)对比,dot-elisa(酶联免疫吸附实验,酶联免疫试剂盒)具有简练、节省抗原等利益,而且作用可长时刻保留;但其也有缺少,首要是在作用断定上对比片面,特异性不行。