1） acr及bis的纯度：应选用分析纯的acr及bis，如试剂不纯，含有杂质或丙烯酸时，则凝胶聚合不均一，或聚合时间延长甚至不聚合， 因而需进一步纯化。 acr和bis贮液的ph值为4.9-5.2，当ph值的改变大于0.4ph单位则不能使用，因在偏酸或偏碱的环境中，它们可不断水解放出丙烯酸和nh4+ 而引起ph值改变，从而影响凝胶聚合。 因此，配制的acr和bis贮液应置棕色瓶中，4℃贮存 ，存放期一般不超过1-2个月为宜。
2）ap、核黄素、temed：增加ap和temed可加快聚合速率，但过量的ap和temed会引起电泳时烧胶和谱带变形。应选择合适的配方使聚合在40-60min内完成。
3）ph：碱性条件下聚合快，但碱性过强时胶硬而脆，需高ph时应减少ap和temed用量，制酸性胶可加agno3等促进聚合。
4）温度：温度高聚合快，但高浓度凝胶聚合时易产生小气泡，低温(5℃)聚合凝胶会变得脆而混浊，一般25-35℃聚合较好。
5）氧分子：氧分子阻碍凝胶聚合，故不含sds的凝胶先抽真空脱气，再加引发剂。
聚丙烯酰胺凝胶电泳
page应用范围广，可用于蛋白质、酶、核酸等生物分子的分离、定性、定量及少量的制备，还可测定相对分子质量、等电点等。 聚丙烯酰胺凝胶电泳又有以下几种：
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
连续密度梯度电泳
聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳
聚丙烯酰胺凝胶双向电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳 （dna序列分析）
1 仪器： pcr扩增仪（96孔）、序列分析电泳槽：dycz-20c/dycz-20g、高压电源：dyy-10c或dyy-12型 水平摇床（wd-9405d）、电子天平 (精确1毫克) 、移液枪：wd-2108 、双显磁力搅拌器、高压蒸汽灭菌锅、ph计、水浴锅、高速台式冷冻离心机、微型离心机：wd-2105a/b等
2 实验试剂： 乙二胺四乙酸二钠(edta-na2)、tris碱、10×buffer、 dntp、taqdna聚合酶、引物、去离子甲酰胺、溴酚蓝 、 二甲苯青ff、甲叉双丙烯酰胺、丙烯酰胺、硼酸、尿素、 亲和硅烷、剥离硅烷、四甲基乙二胺、过硫酸铵、 、dna marker(根据pcr片段大小选择合适的marker范围， 如ssr实验的范围在100bp—400bp之间)
聚丙烯酰胺凝胶分为非变性凝胶和变性凝胶 所谓非变性凝胶，即在凝胶中不加sds和巯基乙醇等变性剂，这种凝胶中，蛋白质仍保持活性，其迁移率受它的静电荷与分子大小两个因素的影响。因此在非变性凝胶中进行电泳是不能测得分子量的，常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。 所谓变性凝胶，即在凝胶中加入变性剂，如尿素、sds(十二烷基磺酸钠)、巯基乙醇、dtt等。这些变性剂可以破坏或改变蛋白质的结构，把绝大部分蛋白质分离成组成它们的亚基。同时在蛋白质分子周围包围了大量负电荷。这种电荷基本上掩盖了无变性剂存在时正常就有的任何电荷。蛋白质在这种变性凝胶中的迁移率与它们分子量的对数成直线关系。因此利用变性凝胶进行电泳可以测得蛋白质的分子量。目前应用较多的变性剂为sds。