检测原缓冲液配方:
800mm 氯化钠+100mm lingsuanqingerna+100mm edta
100*tcep 配方:
0.4gtcep+10ml 二级水
bsa 配方:
bsa 固体+检测原缓冲液,配成浓度为 10mg/ml 的 bsa 液体。
10mg/ml bsa 液体+250ul 的 10mg/ml 的 smcc,浓度为 10mg/ml ,25 度水浴 2 小时。
然后在检测原缓冲液里透析过夜,透析完成后,用检测原偶联缓冲液稀释成 4mg/ml 的 bsa液体。
bsa 偶联多肽步骤:
用 125ul 的检测原缓冲液稀释 100*tcep 到 1*tcep,用于溶解 1mg 的裸肽;
加 100ul,0.2m lingsuanqingerna,用于调整 ph 值到 7.0;
加 250ul bsa(浓度 4mg/ml)。
终浓度算下来为 2.105mg/ml,生产为计算方便,按照 2mg/ml 计算。
37℃静置 4 小时或者 4℃静置过夜后,跑胶看是否偶联成功。