人cd44变体6elisa检测试剂盒操作步骤:
. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔0孔,在di一、第二孔中分别加标准品00μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为80 ng/l,20 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,5 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后5分钟。
人结直肠腺癌细胞;ht-29
人巨细胞白血病细胞株;mo7e
人非小细胞肺腺癌细胞;nci-h57
人前列腺癌细胞;pc-3 [pc3]
人红系白血病细胞;tf-
人乳腺导管瘤细胞;uacc82
人类原巨核细胞型白血病细胞;ut-7
人恶性黑色素瘤细胞;a-375 [a375]
人乳腺导管瘤细胞;bt-474
人结直肠腺癌细胞;colo 205
人结直肠腺癌细胞;colo 320dm [colo320dm]
人burkkit淋巴瘤细胞;daudi
人十二脂肠腺癌;hutu-80
人鼻咽癌细胞;cne-2z
人胎盘绒膜癌细胞;bewo
人结直肠腺癌细胞;hct 6 [hct6]
人t淋巴瘤转基因细胞;jurkat d,e
人t淋巴瘤细胞jurkat亚系;jurkat77
人口腔表皮样癌细胞;kb
人结直肠腺癌细胞;lovo
人结直肠腺癌细胞;sw480 [sw 480;sw-480]
急性t淋巴细胞白血病细胞;tall-04
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人宫颈癌细胞;c-33a
人宫颈癌细胞;hela 229 [hela229]
人宫颈癌细胞;hela p0s-f
人宫颈癌细胞;hela s3 [helas3]
人胰腺腺泡上皮癌;hpac
人t淋巴细胞白血病细胞;hut 78
人肺鳞癌细胞;nci-h520
人前列腺癌高转移细胞株;pc-3m ie8
人前列腺癌低转移细胞株;pc-3m-2b4
人肺巨细胞癌高转移细胞株;pg-be
人肺巨细胞癌低转移细胞株;pg-lh7
人结直肠腺癌细胞;sw620 [sw 620;sw-620]
人脑星形胶质母细胞瘤;u-87 mg [u87mg;u87 mg]
人肺癌细胞;a-427 [a427]
人胰腺癌细胞;aspc-
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;c98
人髓母细胞瘤细胞;daoy
人乳腺导管癌细胞;hcc38
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;m69
人胃癌细胞;mgc-803
绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞;mgc803-gfp
人胃癌细胞;mkn-45
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;mum-2b