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HPLC-ELSD测定*中黄芪甲苷的含量

摘要
黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。春秋两季采挖,除去须根及根头,晒干。由于来源、产地、处理方式的不同,会导致黄芪的质量*不同,从而直接影响其药用价值,因此必须建立一套完整的质量控制方法。
内容
hplc-elsd检测方法测定*中黄芪甲苷的含量
黄芪为豆科植物蒙古黄芪astragalus membranaceus(fisch.)
bge.var.mongholicus(bge.)hsiao或膜荚黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge.的干燥根。春秋两季采挖,除去须根及根头,晒干。
由于来源、产地、处理方式的不同,会导致黄芪的质量*不同,从而直接影响其药用价值,因此必须建立一套完整的质量控制方法。
一、实验过程
1.1 仪器
elsd model 200 softa coporation
液相系统:泵
工作站:色谱采集系统
1.2 试剂
乙腈:色谱纯
水 :纯净水
甲醇:色谱纯
黄芪甲苷对照品;*;黄芪阴性试剂
1.3 色谱系统及elsd参数
色谱柱:c18 5μ 250×4.6mm
流动相:乙腈:水(32:68)
流速:1.00 ml/min
elsd参数: df=60℃;sc=30℃
为您提供。
下图为在上述色谱条件下测定的黄芪对照品与*elsd色谱图:
1.4 曲线方程及线性关系
取对照品溶液配制成0.1、0.3、0.5、0.7、1mg/ml的溶液,以浓度对数值为横坐标,以峰面积对数值为纵坐标作回归,方程为:y=1.48528x+2.26890,r2=0.9997,进样量为20μl(满环进样),浓度在0.1-1mg/ml呈良好的线性关系。
1.5 系统适应性实验
取供试品溶液2.0ml,按上述色谱条件,满环进样20μl,黄芪甲苷的保留时间为9.5min左右,理论塔板数不低于10000,托尾因子为1.06左右,分离度不小于5.0。
1.6样品的含量测定
分别取*三批,按上述色谱条件,满环进样20μl。测定结果见表1。
表1样品中黄芪甲苷的含量测定
批号
含量mg
0509101
2.35
0509103
1.98
0509105
2.17
二、讨论
elsd主要用于没有紫外吸收或为紫外末端弱吸收的样品,或流动相有紫外吸收干扰或梯度洗脱时基线漂移影响测定;用elsd检测,流动相在漂移管便气化蒸发,不影响样品检测。
黄芪甲苷是黄芪为原料的中药制剂的主要质量控制指标。其含量测定方法有薄层色谱、hplc—紫外放,采用elsd作为检测器—hplc法也已见报道,但都存在样品前处理复杂、色谱干扰多且干扰成分大等缺点。
由于elsd本身的响应特性,黄芪甲苷浓度与其峰面积值并不呈线性,而将浓度与峰面积同时取以10为底的对数后可在一定范围内(0.1~1mg/ml)得到理想的线性关系(r2=0.9997)。
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