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饲料中*的测定(*1068号公告-5-2008)

适用范围
适用于饲料中*的检测。(本实验样品采用复合饲料)
参考标准:《*1068号公告-5-2008 饲料中*的测定 高效液相色谱法》。
提取步骤
精que称取5g样品置于50ml的螺口尖底离心管。
1)加入10ml水,摇匀,静止10min,加入10ml提取剂,振荡数秒,放气,再次震荡,放气,超声10min,4000rpm下离心10min,移取上清液;
2)再次加入10ml提取剂,振荡数秒,放气,再次震荡,放气,超声10min,4000rpm下离心10min,移取上清液,合并上清液,取5ml上清液置于15ml离心管中,在40℃下氮吹至干,用2ml流动相c溶解待净化。
spe净化步骤
spe柱:月旭welchrom® p-scx;
规格:60mg/3ml;
活化:依次3ml甲醇,3ml水活化,弃去;
上样:待净化液全部上样,控制流速,不宜过快,弃去;
淋洗:依次3ml0.1mol/l盐酸溶液,5ml甲醇,弃去;
洗脱:精que移取4ml的5%氨化甲醇洗脱,抽干并收集于15ml离心管中;
复溶:洗脱液于40℃水浴氮吹干,用流动相c定容至1ml,经0.22μm有机滤头,供液相检测。
注:流动相c:300ml乙腈加水定容至1000ml,在加入5ml磷酸(乙腈-水-磷酸=30:70:0.5)
色谱条件
色谱柱:月旭ultimate® xb-c18,4.6×250mm,5μm;
流动相:a-水,b-甲醇,c-见2-4(梯度见表1);
流速:1.000ml/min;
柱温:30℃;
进样量:20μl;
检测波长:220nm。
色谱图或者加标回收率结果
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