三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖，俗称蔗糖素，由英国泰莱公司(tate&lyie)与伦敦大学共同研制并于1976年申请的一种新型甜味剂。由于其具有甜度高(甜度为蔗糖的600倍)、甜味纯正等特点，被认为是目前zui的功能性甜味剂之一，代表了目前强力甜味剂研究的zui高水平。虽然科学家们经过长期的毒理实验证明其具有较高的安全性，但也有三氯蔗糖可诱发偏头疼发作的报道。
建立食品中三氯蔗糖的测定方法，可为食品生产企业提供生产性指导，并为质量监督部门提供食品质量监管依据。我国国家标准《gb 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定》中制定了三氯蔗糖的hplc-elsd检测方法。
方法优势：
迪马科技在参考国家标准《gb 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定》基础上，进行了方法优化，推出《食品中三氯蔗糖的测定》方法，该方法：
采用固相萃取-液相色谱法测定食品中的三氯蔗糖，使用proelut pls 固相萃取柱净化样品，通过hplc-elsd检测；
前处理步骤简单、净化效果好、重现性好，定量限7.5 mg/kg，符合《gb 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定》对三氯蔗糖的*规定；
适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。
以下为详细解决方案，敬请参考！
食品中三氯蔗糖的测定——hplc法
1、适用范围
本方案适用于液态奶、酸奶、酱油、醋、饼干、奶酪、奶茶、可乐和果冻中三氯蔗糖的检测，方法定量限7.5 mg/kg。
2、标准品配制
标准储备溶液：准确称取标准品，用水配制成10 mg/ml的储备液，吸取一定体积10 mg/ml储备液用水配成浓度为1000 μg/ml的储备液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪类液体：液态奶、酸奶、酱油和醋
10 ml样品，加入8 ml 水和2 ml 200 g/l乙酸铅溶液，振荡2 min，超声提取5 min，6000 rpm离心5 min，取10 ml上清液，待净化；
3.2 含蛋白脂肪类固体：饼干、奶酪和奶茶
5 g样品，加入8 ml 水和2 ml 200 g/l乙酸铅溶液，振荡2 min，超声提取5 min，6000 rpm离心5 min，取10 ml上清液，待净化；
3.3 饮料：可乐（量取前超声排气泡）
10 ml样品，加入10 ml 水，混匀，取10 ml，待净化；
3.4 果冻
5 g样品，加入5 ml 水，热水超声溶解，混匀，趁热净化。
注：《gb 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定》中提取液为75%甲醇水溶液，减压浓缩过程中暴沸严重，不易操作。
4、净化——proelut 200 mg/6 ml pls（cat.#：68012）
(1)活 化：
依次向柱中加入5 ml甲醇、5 ml水，弃去流出液；
(2)上 样：
将待净化液加入柱中，弃去流出液（控制流速不超过每秒1滴）；
(3)淋 洗：
(4)洗 脱：
向柱中加入5 ml 20%甲醇水溶液，弃去流出液；
向柱中加入3 ml甲醇，收集流出液；
(5)定 容：
将洗脱液在50 ℃下减压蒸干，用流动相定容至1 ml，供hplc分析。
5、色谱条件
色谱柱：diamonsil c18(2) 150 × 4.6 mm，5 μm（cat.#：99601）
流速：1.0 ml/min
进样量：20 μl
柱温：35 ℃
检测器：sedex lt-elsd，温度：40℃，压力：3.5 bar，gain：6
流动相：a：水；b：乙腈
梯度设置
时间/min.
0
14
15
22
23
30
a（%）
89
89
10
10
89
89
b（%）
11
11
90
90
11
11
6、添加回收结果
食品中三氯蔗糖的hplc检测的添加回收结果
添加水平200 mg/kg
添加水平20 mg/kg
添加水平7.5 mg/kg
空白含量(μg/ml)
回收率(%)
加标量
回收率(%)
加标量
回收率(%)
加标量
早餐奶
99.01
10 mg/ml 200 μl
109.82
1000 μg/ml
200 μl
96.52
1000 μg/ml
75 μl
—
巧克力奶
99.70
10 mg/ml 200 μl
100.91
1000 μg/ml
200 μl
95.88
1000 μg/ml
75 μl
—
咖啡奶
100.34
10 mg/ml 200 μl
112.34
1000 μg/ml
200 μl
126.00
1000 μg/ml
75 μl
—
养乐多
128.83
10 mg/ml 200 μl
—
—
—
—
130.8
酸奶
—
—
105.58
1000 μg/ml
200 μl
123.42
1000 μg/ml
75 μl
—
酱油
77.85
10 mg/ml
200 μl
—
—
—
—
113.48
醋
108.22
10 mg/ml
200 μl
143.64
1000 μg/ml
200 μl
205.47
1000 μg/ml
75 μl
—
饼干
—
—
102.64
1000 μg/ml
100 μl
103.28
1000 μg/ml
37.5 μl
—
奶酪
—
—
88.04
1000 μg/ml
100 μl
82.78
1000 μg/ml
37.5 μl
—
奶茶
—
—
101.48
1000 μg/ml
100 μl
169.05
1000 μg/ml
37.5 μl
—
可乐
—
—
103.97
1000 μg/ml
200 μl
98.49
1000 μg/ml
75 μl
—
果冻
—
—
93.89
1000 μg/ml
100 μl
96.27
1000 μg/ml
37.5 μl
—
食品中三氯蔗糖的测定——hplc法相关产品信息：
货号
名称
规格
样品前处理
68012
proelut pls
200 mg/6 ml, 30/pk
244358
12管防交叉污染真空spe萃取装置
12位
4803
1,3,6ml柱管通用连接器
15/pk
4806
考克(控制流量)
15/pk
99011
真空/正压两用泵，无油
1/pk
99013
抽滤瓶套装
(包括硅橡胶管2米,2l抽滤瓶及橡胶塞)
1/pk
30039
fitmax针头式过滤器 nylon
13 mm,0.22 μm 100/pk
30040
fitmax针头式过滤器 nylon
13 mm,0.45 μm 100/pk
标准品
53-69293-100g
三氯蔗糖[56038-13-2]
100 g
色谱柱及保护柱
99601
diamonsil c18(2)
150 × 4.6 mm，5 μm
hplc溶剂?缓冲盐?离子对试剂
50101
乙腈 hplc级
4 l
50102
甲醇 hplc级
4 l
通用色谱产品
52401b
瓶架/蓝色（现货）
50孔
52401a
瓶架/白色（现货）
50孔
1034
样品瓶（棕色/螺纹）
2 ml, 100/pk
1035
样品瓶盖/含垫（已经组装）
100/pk
h80465
hplc 进样针
25 μl
红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035*