血清铁浓度测试盒(比色法)测定与注意事项:
一、测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2.标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3.空白管:取ep管,依次加入125μl蒸馏水,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a空白管。
4.标准管:取ep管,依次加入125μl标准液,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a标准管。
5.测定管:取ep管,依次加入125μl血清,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dl)=[c标准液×(a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)]×v总
=10 × (a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)
c标准液:100 μmol/l fe3+标准液;v总:标准液总体积1ml;1 dl=0.1 l。
二、注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(ep管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 检出限为1μmol/l。
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2.标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3.空白管:取ep管,依次加入125μl蒸馏水,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a空白管。
4.标准管:取ep管,依次加入125μl标准液,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a标准管。
5.测定管:取ep管,依次加入125μl血清,125μl试剂一,125μl试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μl氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为a测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dl)=[c标准液×(a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)]×v总
=10 × (a测定管-a空白管)÷(a标准管-a空白管)
c标准液:100 μmol/l fe3+标准液;v总:标准液总体积1ml;1 dl=0.1 l。
注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(ep管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 检出限为1μmol/l。
关键词:分光光度计 酶标仪 浓度计