交链孢霉属通用探针法荧光pcr检测试剂盒样品rna的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的trizol试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。rna全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的trizol试剂的60%。③rna沉淀 将水相上层转移到一干净无rna酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的rna,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的rna沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④rna清洗 移去上清液,每1mltrizol试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用depch2o配制),清洗rna沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤rna干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使rna沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解rna沉淀 溶解rna时,先加入无rna酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的rna溶液保存于-80℃待用。
2 rna质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的te溶液将分光光度计调零。然后取少量rna溶液用te稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定rna溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
a260下读值为1表示40 g rna/ml。样品rna浓度(g/ml)计算公式为:a260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
phospho-apbb1 (ser175)磷酸化铁蛋白fe65抗体
phospho-apbb1 (ser347)磷酸化铁蛋白fe65抗体
phospho-amyloid precursor protein (thr743)磷酸化app淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-amyloid precursor protein (ser730)磷酸化app淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-atf2 (ser322)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-atf2 (thr51)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-apc1 (ser377)磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白apc1抗体
asap1发育分化增强因子1抗体
phospho-asap1 (tyr782)磷酸化发育分化增强因子1抗体
akt3蛋白激酶b3
girdin肌动蛋白结合蛋白girdin抗体
akap2蛋白激酶a2抗体
at2r2血管紧张素ⅱ受体2抗体
ash1lash1蛋白抗体
aadacl2芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体
aamp血管内皮细胞迁移蛋白抗体
akr1b10醛糖还原酶相关蛋白质抗体
akr1c2胆汁酸结合蛋白ddh2抗体
angptl3血管生成素样蛋白3抗体
acylglycerol kinase甘油酯激酶线粒体抗体
phospho-alpha adducin(ser726)磷酸化内收蛋白a1抗体
atg16l2自噬体atg16l2蛋白抗体