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人体试样的准备及处理

人体试样的准备及处理
人体试样可以分为均匀样品和非均匀样品。均匀样品包括血浆、血清、全血、唾液、胆汁、乳汁、淋巴液、脑脊液、汗液、尿液和性腺分泌液等体液。非均匀样品包括脑、心、肺、胃、肝、脾、肾、肠、子宮、睾丸、肌肉、皮肤、脂肪、组织、粪便排泄物等。几种常见人体试样的处理方法举例说明如下。
1)血液样品
(1)血浆。将采集的血液置于含有抗凝剂的试管中,混合后以2500~3000 rpm离心分离5 min使血细胞分离出来,分取上清液即为血浆。抗凝剂临床常用edta、肝素、草酸盐、枸橼酸盐、氟化钠等。血浆为全血的一半量,血浆中药物浓度既反映了药物在靶器官的存在状况,又较好地体现了药物浓度和治疗作用之间的关系。血浆是临床疾病治疗的生物样品。
(2)血清。采取的血样在室温下放置30~60 min,待凝结出血饼后,用玻璃棒或细竹棒轻轻地剥去血饼,以2000~3000 rpm离心分离5~10 min,分取上清液即为血清。血清只为全血的20%~30%。血浆及血清中的药物浓度测定值通常是相同的。血清成分更接近组织液的化学成分,测定血清中的药物含量比全血更能反映机体的具体状况
(3)全血。将采集的血液置于含有抗凝剂的试管中,保持血浆和血细胞均相状态,即为全血。全血不易保存,血细胞中含有影响测定的干扰物质,故很少采用全血测定药物浓度。
采血时的保存注意事项:①血浆或血清样品必须置于硬质玻璃试管中*密塞后保存;②采血后及时分离出血浆或血清再储存。若不预先分离,血凝后冰冻保存。冰冻有时引起细胞溶解将妨碍血浆或血清的分离,有时因溶血影响药物浓度。
2)尿液样品
尿液主要成分为约97%的水,其余为盐类、尿素、尿酸、肌酐等,一般没有蛋白质糖和血细胞。体内药物清除主要是通过尿液排出,大部分药物以原型从尿中排泄。尿液取样方便,并对机体无损伤。
若收集24 h的尿液不能立即测定时,为防止尿液生长细菌,令尿液中化学成分发生变化,应加入防腐剂置于冰箱中保存。常用防腐剂为浓盐酸、冰醋酸、甲苯、二甲苯、氯仿、。每种尿液防腐剂都有其用量和适用测定成分的规定。例如,利用甲苯等可以在尿液的表面形成薄膜,适用于尿肌酐、尿糖、蛋白质、丙酮等生化项目的测定;利用乙酸等改变尿液的酸碱性来抑制细菌生长,适用于24 h尿醛固酮的测定。
3)唾液样品
唾液是由腮腺、颌下腺、舌下腺和口腔黏膜内许多分散存在的小腺体分泌液组成的混合液。唾液的相对密度为1.003~1.008,ph为6.2~7.6。如果唾液分泌量增加,则趋向碱性,接近血液ph。有些药物在唾液中的浓度可以反映游离型药物在血浆中的浓度。在刺激少的安静状态下,漱口后15 min采集唾液样品,立即测量除去泡沫部分的体积,以3000 rpm离心分离10 min,取上清液直接测定或冷冻保存,解冻后,为避免误差,应充分搅拌均匀后再测定。
4)组织样品
(1)匀浆化法:在组织样品中加入一定量的水或缓冲液,在刀片式匀浆机中匀浆获得组织匀浆,使被测药物溶解,取上清液萃取。
(2)沉淀蛋白法:在组织匀浆中加入蛋白沉淀剂,沉淀蛋白质后取上清液萃取。
(3)酶水解:在组织匀浆中加入适量的酶和缓冲液,水浴水解一定时间,待组织液化后,过滤或离心,取上清液萃取。常用酶为枯草菌溶素。
(4)酸水解或碱水解:在组织匀浆中加入适量的酸或碱,水浴水解一定时间,待组织液化后,过滤或离心,取上清液萃取。
5)头发样品
一般采集枕部发样0.05 g,使用中性洗涤剂浸泡10 min,弃去洗涤剂,用去离子水漂洗3次,用丙酮浸泡并搅拌10 min,再用去离子水漂洗3次,干燥并保存于干燥器内。头发样品中待测物的提取方式包括甲醇提取、酸水解、碱水解、酶水解,其中酶水解方法较为常用。
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