中华人民共和国农业行业标准
ny/t 3902-2021
水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖
和蔗糖的测定离子色谱法
前言
本文件按照gb/t 1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由农业农村部乡村产业发展司提出。
本文件由农业农村部农产品加工标准化技术委员会归口。
本文件起草单位：中国农业大学、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、赛默飞世尔科技（中国）有限公司、青岛盛瀚色谱技术有限公司。
本文件主要起草人：徐贞贞、陈芳、王雪、廖小军、高立红、朱新勇、王冰峰、樊永蓉。
1范围
本文件规定了水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的测定方法。
本文件适用于水果蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的含量测定，不适用于脂肪含量大于10%的水果、蔬菜及其制品中的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖含量的测定。
本文件阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的定量限见附录a。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的现范性引用而构成本文件必不ke少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
gb/t 6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
水果、蔬菜及其制品中的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖经水提取后离子色谱法测定，以氢氧化钠溶液为淋洗液、阴离子交换分离、脉冲安培检测器检测，以色谱峰保留时间定性，外标法定量。
5试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为gb/t 6682规定的一级水。
5.1试剂
氢氧化钠溶液（50%）：色谱纯，离子色谱专用。
5.2试剂配制
氢氧化钠溶液（200mmol/l）：称取10.4ml氢氧化钠溶液（5.1），用预先脱气的水稀释并定容至1 000 ml，惰性气体保护。
5.3标准品
5.3. 1阿拉伯糖（c5h10o5，cas号：5329-37-0）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3.2半乳糖（c6h12o6，cas号：59-23-4）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3.3葡萄糖（c6h12o6，cas号：50-99-7）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3.4果糖（c6h12o6，cas号：57-48-7）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3.5麦芽糖（c12h24o12，cas号：6363-53-7）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.3.6蔗糖（c12h22o12，cas号：57-50-1）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
5.4标准溶液的配制
5.4.1标准储备液（10mg/ml）：分别准确称取经过（96±2）℃干燥2 h的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖各1.000 g于100 ml容量瓶中，用水溶解并定容至刻度。置于4℃密封保存，有效期一个月。
5.4.2标准工作液（1.0mg/ml）：分别吸取1.0ml阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖标准储备液（5.4.1）于10ml容量瓶中，用水稀释定容至刻度，配制浓度为1.0mg/ml标准工作液，临用现配。
5.4.3混合系列标准工作液：准确吸取标准工作液（5.4.2）适量，用水稀释得到浓度分别为0.5mg/l、1.0 mg/l、5.0 mg/l、8.0 mg/l、10.0 mg/l、12.0 mg/l、15.0 mg/l的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的混合系列标准工作溶液，临用现配。
注：可根据试样中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖果糖、麦芽糖和蔗糖的种类与浓度调整混合工作液的组成及浓度范围。
5.5材料
5.5. 1水性滤膜针式过滤器：0.22μm和0.45μm。
5.5.2定性快速滤纸。
6仪器设备
6.1离子色谱仪：配有梯度泵，脉冲安培检测器，au工作电极。
6.2分析天平：感量0.01 g~0. 0001 g。
6.3涡旋振荡器。
6.4离心机：转速不低于9500 r/min。
6.5组织捣碎机。
6.6样品粉碎机。
6.7超声波提取仪。
6.8电热恒温鼓风干燥箱。
7样品
7.1试样制备
取适量有代表性的样品，液态均匀样品直接摇匀，固态非均匀样品切碎后匀浆混匀。
7.2提取净化
称取试样1.00g（干制样品称取0.10g），准确加入50ml水，涡旋混匀10min，超声30min后，9000r/min离心10min，移取上清液。将前述上清液经定性快速滤纸粗过滤后，依次过0.45μm和0.22μm的针式过滤器过滤得到待测样品，同时做空白试验。
注：试样中糖含量超出工作曲线浓度时，应选择适当的稀释倍数，以水稀释。
8分析步骤
8.1离子色谱条件设置
a）色谱柱：pa20型阴离子分离柱（3mm×150mm）和pa20型保护柱（3mm×30mm），或等效色谱柱；
b）淋洗液a：水；
c）淋洗液b：氢氧化钠溶液（200 mmol/l）；
d）柱温：30℃；
e）流速：0.4ml/min；
f）进样量：10μl；
g）工作电极：au电极；
h）参比电极：ag/agcl参比电极；
i）检测池温度：30℃；
j）洗脱条件见表1。
表1流动程序
时间min
流动相a%
流动性b%
0.00
95
5
20
95
5
20.1
80
20
30
80
20
30.1
0
100
40
0
100
40.1
95
5
50
95
5
8.2标准工作曲线绘制
按照8.1设定的色谱工作条件，待仪器稳定后，依次测定混合系列标准工作液（5.4.3）中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的色谱峰面积。根据混合系列标准工作液（5.4.3）中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的浓度与相应峰面积绘制阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的浓度色谱峰面积标准曲线，标准品色谱图见附录b中的图b.1。
8.3试样溶液测定
将试样溶液按照8.1设定的色谱工作条件进行测定，根据保留时间定性，根据标准曲线得到试样中糖的浓度，同时测定试剂空白试验。
9结果计算和表述
试样中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖或蔗糖含量xi以质量分数计，单位为克每千克（g/kg），按公式（1）计算。
式中：
xi——试样中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量数值，单位为克每千克（g/kg）；
c——试样溶液中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖和麦芽糖的浓度数值，单位为毫克每升（mg/l）；
c0——试剂空白中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖和麦芽糖的浓度数值，单位为毫克每升（mg/l）；
v——提取液体积数值，单位为毫升（ml）；
f——试样溶液稀释倍数；
m——试样的质量数值，单位为克（g）；
1 000——换算系数。
阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量≥1g/kg时，计算结果保留3位有效数字；阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖或麦芽糖的含量＜1 g/kg时，计算结果保留2位有效数字。
10精密度
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
11其他
当称样量为1.00g（干制样品为0.10g）时，本文件水果、蔬菜及其制品中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖的样品检出限和样品定量限见附录a。