我司为客户分析elisa试剂盒操作问题:
一、细胞上清液样本如何处理?
答:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用pbs(ph7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
二、为什么有的试剂盒是采用竞争elisa法?
答:小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗体愈少,后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素、药物等elisa测定多用此法。
三、用什么软件处理elisa检测的数据比较好?
答:elisa标准曲线拟合可以应用curve expert软件进行数据分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。