分离与培养：1、无菌条件下，取出1-3d 龄sd大鼠心房组织，然后用pbs将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；2、往组织块中加入4 ml酶消化液（0.1% yi酶和0.1% i型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% fbs培养基终止消化后4℃放置；3、剩下的组织再加入3～4ml酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ fbs dmem/f12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％co2 培养箱中培养；5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养。细胞处理：1、复苏细胞：
将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4ml培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1ml培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2、细胞传代：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000rpm，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。