当前位置:首页>生理生化试剂盒>常量分光光度计法>辅酶i系列>乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，ldh）试剂盒
乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，ldh）试剂盒商品货号：qs1001
英文名称：lacate dehydrogenase（ldh）assay kit
别名：乳酸脱氢酶试剂盒 ldh kit 乳酸脱氢酶（ldh）试剂盒 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒
检测方法：常量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
qs1001-50管/24样 50管/24样 ￥170.00元
产品详细介绍产品说明书
测定意义：
ldh（ec 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着nad+/nadh之间互变。
测定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
货号：qs1001 规格：50管/24样
乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，ldh）试剂盒说明书
分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
ldh（ec 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着nad+/nadh之间互变。
测定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：30ml×1瓶， 4℃保存；
试剂一：液体15 ml×1瓶， 4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入1.3 ml双蒸水充分溶解备用，配好后-20 ℃保存，可保存两周，禁止反复冻融；
试剂三：液体15 ml×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体50 ml×1瓶，4℃保存；
操作步骤：
一、样品测定的准备：
细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500-1000:1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200w，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1:5-10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。血清（浆）样品：直接检测。二、测定操作：
分光光度计预热30min以上，调节波长至450nm，蒸馏水调零。样本测定（在ep管中加入下列试剂）试剂名称(μl)
测定管
对照管
样本
50
50
试剂一
250
250
试剂二
50
蒸馏水
50
充分混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴15min
试剂三
250
250
充分混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴15min
试剂四
750
750
充分混匀，室温静置3min，450 nm下测定吸光度，计算δa=a测定管-a对照管。每个测定管需要设一个对照管。
ldh活力单位计算：
标准条件下测定的回归曲线， y = 0.725x (x为标准品浓度，μmol/ml；y为对吸光度)。血清（浆）ldh活力的计算单位的定义：每ml血清（浆）每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。
ldh（u/ml）=δa÷0.725÷t×103=92×δa
细胞、细菌和组织中ldh活力的计算按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1 nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。
ldh（u/mg prot）=[δa÷0.725×v 1] ÷ (v1×cpr) ÷t×103 =92×δa÷cpr
需要另外测定，建议使用本公司bca蛋白质含量测定试剂盒。
按样本鲜重计算：单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。
ldh（u/g鲜重）=[δa÷0.725×v 1] ÷ (w ×v1÷v2) ÷t×103 =92×δa÷w
按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1nmol丙酮酸定义为一个酶活力单位。
ldh（u/104 cell）= [δa÷0.725×v 1]÷(500 ×v1÷v2) ÷t×103 =0.184×δa÷w
v1：加入反应体系中样本的体积，0.05 ml；v2：加入提取液的体积，1 ml； t：反应时间，15 min；cpr：蛋白质浓度，mg/ml；w：样品质量，g; 500：细胞或细菌总数，500万。
辅酶ⅰ系列 　 　 　 　
qs1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 500
ms1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 920
qs1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 可见分光光度法 50管/24样 170
ms1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 微量法 100管/48样 330
qs1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 微量法 100管/96样 850
qs1005-50 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 3200
qs1005-25 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 25管/24样 2000
ms1005 柠檬酸合酶(cs）测试盒 微量法 100管/48样 3500
qs1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 720
ms1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 800
ms1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 微量法 100管/96样 1550
qs1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 420
ms1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 微量法 100管/96样 800
qs1010 nad激酶（nadk）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 600
ms1010 nad激酶（nadk）测试盒 微量法 100管/48样 1100
qs1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 紫外分光光度法 25管/24样 1280
ms1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 微量法 100管/96样 2500