聚乙烯亚胺(pei)是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何ph下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体。pei,可用作转染试剂,它可以缩聚dna分子形成颗粒并转染真核细胞。pei 25k™线性聚乙烯亚胺转染试剂(分子量25000)被证明为转染效率zui hao的pei转染试剂,下面就以pei 25k™线性聚乙烯亚胺转染试剂(货号:23966-1/23966-100)为例来说明polysciences pei转染试剂的配制过程。
一、产品特性
cas no
9002-98-6, 26913-06-4 分子式 (ch2ch2nh)n
熔点
73-75º 外观
白色或黄色固体
溶解性 溶于热水,低 ph 值的冷水,甲醇和乙醇;
不溶于:苯,乙mi和丙酮
储存
室温
二、溶液配制
材料:1g pei 25k™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)、1l 纯水、12 m盐酸、10m氢氧化钠、一次性 0.1-0.2µm pes 真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。
器材:1 l 玻璃烧杯、1 l 玻璃量筒、核准 ph 计、2 支 1 ml 塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯(ptfe)搅拌棒、真空泵配制过程:
取1gpei 25k™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)溶于900ml水中;
加热到60-80℃并搅拌;
加入hcl,调节ph 2.0;
盖上烧杯,搅拌3h,直到pei 25k™线性聚乙烯亚胺转染试剂(23966-1)粉末wan全溶解为止;
冷却,直至室温;
再加入naoh ,调节ph6.9-7.1;
将调节好的溶液移到量筒中,加水至1l;
真空过滤消毒;
将消毒好的溶液进行分装,分装好的溶液在-20°c下 保存。
备注:加热/加酸都有利于 pei 溶解。加酸的时候注意用量,多次少量,达到pei wan全溶解即可。
试剂储存:冷冻部分溶液可在-20°c 保存长达一年;部分解冻的溶液可在 4°c 保存2 周,注意不可反复冻融。
粉末储存:未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。