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磷酸缓冲盐的配置方法及作用

pbs缓冲液,是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为na2hpo4、kh2po4、nacl和kcl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于na2hpo4和kh2po4有二级解离,缓冲的ph值范围很广,而nacl和kcl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要pbs还可以补加1 mmol/l cacl2和0.5 mmol/l mgcl2,以提供二价阳离子。配制方法称取8.0g nacl、0.2g kcl、1.44g na2hpo4、0.24g kh2po4溶于800ml蒸馏水中,用hcl调节溶液至7.4,最后加蒸馏水定容至1l即可得0.01m pbs缓冲液。作用pbs是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜ph缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整ph的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用pbs是s选。pbs也不是全能的,有的生物活性物质需要的条件比pbs还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。
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