引物纯化方式有哪些,如何选择?1、c18柱脱盐:
有人称其为简易反相柱,它对dna有特异性的吸附,可以被有机溶解洗脱,但不会被水洗脱,所以能有效地去除盐分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。实际上,它是一种脱盐的作用。这种方法一般不会对普通pcr反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。2、opc纯化:
opc纯化是根据dna保护基(dmtr基)和cartridge柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的dna片段。opc法纯化的dna纯度大于95%。适用于40mer以下引物的纯化。3、page纯:
page纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对dna片段进行分离,然后从凝胶中回收目的dna的方法。page纯化法也是一种非常有效的dna纯化方法,纯化后的dna纯度大于95%,对长链oligo dna (大于50mer)的纯化特别有效。?4、hplc纯化:
hplc纯化是使用高效液相色谱的原理,对dna片段进行纯化。纯度可以大于99%。主要用于短链和修饰引物的纯化。该法的弱点是成本较高,批量生产效率不高。?