肠球菌显色培养基用于快速检测食品、水质和环境中的肠球菌。菌落显红色至紫色,其它菌显无色、黄色或被抑制。显色培养基使用原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;混合显色底物分别与大肠菌群和大肠杆菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上大肠菌群产生橙红色的菌落,大肠杆菌产生蓝绿色的菌落。肠球菌显色培养基使用方法:
1、称取本品32.8g,加入蒸馏水或去离子水1l,搅拌加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌。
2、以无菌手续取样品25g或25ml,加入含225ml无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。
3、采用倾注法:将培养基水浴冷却至约50°c,准备直径90mm已灭菌平皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注约15ml.上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37°c培养24小时。
4、采用表面接种法:冷却至约50°c,摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4c)。样品用划线接种法或滤膜法,37°c培养24小时。
关键词:均质器