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采用纤维素酶检测试剂盒检测为止抗原方法

采用纤维素酶检测试剂盒检测为止抗原方法
中文品名:纤维素酶检测试剂盒[cellg5法]
品名:cellulaseassaykit(cellg5method)
规格1:k-cellg5-4v120/240次(手工)/480次(自动分析仪)
规格2:k-cellg5-2v60/120次(手工)/240次(自动分析仪)
说明:cellg5检测试剂盒用于检测纤维素内切酶(1,4-β-葡聚糖内切酶)包含两种组分:1)4,6-o-(3-ketobutylidene)-4-nitrophenyl-β-d-cellopentaoside(bpnpg5)和2)热稳定的β-葡萄糖苷酶。
采用纤维素酶检测试剂盒双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测od值:在elisa检测仪上,于450nm(若以abts显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔od值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。
采用纤维素酶检测试剂盒间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用ddw洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测od值:在elisa检测仪上,于450nm(若以abts显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔od值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。
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