组织型纤溶酶原激活剂酶联免疫试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
泛素连接酶e3a(ube3a)重组蛋白
防御素β103b(defβ103b)重组蛋白
防御素β112(defβ112)重组蛋白
防御素β113(defβ113)重组蛋白
防御素β124(defβ124)重组蛋白
防御素β126(defβ126)重组蛋白
防御素β131(defβ131)重组蛋白
防御素β2(defβ2)重组蛋白
分泌跨膜蛋白1(sectm1)重组蛋白
封闭蛋白9(cldn9)重组蛋白
脯氨酸/丝氨酸丰富卷曲螺旋蛋白1(psrc1)重组蛋白
脯氨酰羧肽酶(prcp)重组蛋白
辅肌动蛋白α2(actn2)重组蛋白
辅肌动蛋白α3(actn3)重组蛋白
钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶ⅱγ(camk2γ)重组蛋白
钙非依赖性磷脂酶a2(ipla2)重组蛋白
钙结合蛋白(cr)重组蛋白
钙联蛋白(cnx)重组蛋白
钙黏蛋白26(cdh26)重组蛋白
干扰素α(ifnα)重组蛋白
干扰素α2(ifnα2)重组蛋白
干扰素α4(ifnα4)重组蛋白
干扰素γ(ifnγ)重组蛋白
干扰素诱导内质网关联病毒抑制蛋白(viperin)重组蛋白