植物呕吐毒素(vomitoxin)elisa试剂盒的使用目的是什么?定性和定量分析各种谷物、饲料及饲料原料、玉米、小麦以及副产物,麦芽啤酒和麦芽汁,微生物,血清,组织,尿等样本中呕吐毒素(vomitoxin)残留的定量检测。
植物呕吐毒素(vomitoxin)elisa试剂盒采用竞争elisa方法,在微孔板包被有呕吐毒素(vomitoxin)偶联抗原,加入呕吐毒素(vomitoxin)标准品或样品,游离呕吐毒素(vomitoxin)与微孔条上预包被的呕吐毒素(vomitoxin)偶联抗原互相竞争抗呕吐毒素(vomitoxin)抗体酶标记物,用tmb底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中呕吐毒素(vomitoxin)含量成反比,通过标准曲线计算样品中呕吐毒素(vomitoxin)的含量。
植物呕吐毒素(vomitoxin)elisa试剂盒使用步骤:
1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5、每孔加入100ul的亲和链酶素-hrp,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7、每孔加入底物a、b各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9、在450nm波长处测定各孔的od值。
关键词:酶标仪 洗板机