柠檬酸合酶（citrate synthase，cs）试剂盒商品货号：qs1005
英文名称：citrate synthase(cs)assay kit
别名：柠檬酸合酶试剂盒 cs kit 柠檬酸合酶(cs）试剂盒 柠檬酸合酶(cs）测试盒,生化法试剂盒
检测方法：常量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
qs1005-25管/24样 25管/24样 ￥2000.00元
qs1005-50管/48样 50管/48样 ￥3200.00元
测定意义：
cs（ec 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理：
cs催化乙酰coa和草酰乙酸产生柠檬酰*，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的dtnb转变成黄色的tnb，在 412nm处有特征吸光值。
货号: qs1005-50 规格：50管/48样
柠檬酸合酶（citrate synthase，cs）试剂盒说明书
分光光度法
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
测定意义：
cs（ec 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理：
cs催化乙酰coa和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶a，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的dtnb转变成黄色的tnb，在 412nm处有特征吸光值。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
试剂组成和配制：
试剂一：液体50ml×1 瓶，-20℃保存；
试剂二：液体10ml×1 瓶，-20℃保存；
试剂三：液体1ml×1 支，-20℃保存；
试剂四：液体50ml×1 瓶，4℃保存；
试剂五：粉剂×2 支，4℃保存，临用前加入800μl 无水乙醇，用不完的试剂4℃保存一周；
试剂六：粉剂×4 支，-20℃保存，临用前加入400μl 蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂七：粉剂×2 支，-20℃保存，临用前加入800μl 蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存；
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
称取约0.1g 组织或收集500万细胞，加入1ml 试剂一和10ul 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。将匀浆600g，4℃离心5min。弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的cs（此步可选做）。在步骤（4）中的沉淀中加入200ul 试剂二和2ul 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200w，超声3 秒，间隔10 秒，重复30 次），用于线粒体cs 测定。分光光度计预热30min 以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。将试剂四、五、六和七在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min。样本测定试剂名称（μl）
测定管
试剂四
780
试剂五
30
试剂六
30
样本
30
试剂七
30
将上述试剂按顺序加入1 ml 玻璃比色皿中，加试剂七的同时开始计时，在412nm 波长下记录20 秒时的初始吸光度a1 和反应2min 后的吸光值a2，计算δa=a2-a1。
cs 活性计算：
按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg 组织蛋白每分钟催化产生1 nmol tnb 定义为一个酶活力单位。
cs（nmol/min /mg prot）＝[δa×v 反总÷（ε×d）×109]÷(v 样×cpr) ÷t=1100×δa÷cpr此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
按样本鲜重计算：单位的定义：每g 组织每分钟催化产生1 nmol tnb 定义为一个酶活力单位。
cs（nmol/min /g 鲜重）=[δa×v 反总÷（ε×d）×109]÷（w× v 样÷v 样总）÷t=222.2×δa÷w
按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每1 万个细菌或细胞每分钟催化产生1 nmol tnb 定义为一个酶活力单位。
cs（nmol/min /104 cell）=[δa×v 反总÷（ε×d）×109]÷（500×v 样÷v 样总）÷t=0.4444×δa
v 反总：反应体系总体积，9×10-4 l；ε：tnb 摩尔消光系数，1.36×104 l / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；v 样：加入样本体积，0.03 ml；v 样总：加入提取液体积，0.202 ml；t：反应时间，2 min；cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；w：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
辅酶ⅰ系列 　 　 　 　
qs1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 500
ms1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 920
qs1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 可见分光光度法 50管/24样 170
ms1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 微量法 100管/48样 330
qs1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 微量法 100管/96样 850
qs1005-50 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 3200
qs1005-25 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 25管/24样 2000
ms1005 柠檬酸合酶(cs）测试盒 微量法 100管/48样 3500
qs1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 720
ms1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 800
ms1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 微量法 100管/96样 1550
qs1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 420
ms1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 微量法 100管/96样 800
qs1010 nad激酶（nadk）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 600
ms1010 nad激酶（nadk）测试盒 微量法 100管/48样 1100
qs1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 紫外分光光度法 25管/24样 1280
ms1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 微量法 100管/96样 2500