rna的提取与核酸的颜色反应操作步骤:1. 取材在天平上准确称取干酵mu3.00g,转移至100ml锥形瓶中。2. 浓盐浸提取 27ml 10%nacl溶液,加入到含干酵mu的锥形瓶中,搅拌均匀;置于90~100°c水浴中,浸提30~60分钟;冷却。3. 离心将锥形瓶中提取液和沉淀全部转移至100ml离心管中,取10ml h2o洗涤锥形瓶,并入离心管中;平衡后以4000转/分钟离心 15分钟;将上清液(即rna提取液)倾入50ml烧杯中,弃去沉淀(菌体残渣)。4. 沉淀rna(1) 冷却:将50ml烧杯置于放有冰块的250ml烧杯中冷却;将温度计插入50ml烧杯中,待溶液冷至10°c以下时,取出温度计。(2) 调pi:缓慢滴加 6nhcl于50ml烧杯中,用玻棒一边轻轻搅拌溶液,一边测量ph值,调节溶液ph至2.0~2.5范围,溶液中白色沉淀逐渐增多,到等电点时沉淀量最多;继续在冰浴中静止15分钟,使沉淀充分。(注意:①严格控制ph;②若搅拌过快核酸难以凝聚沉淀。)5. 离心将小烧杯中溶液和沉淀移至离心管中,再次平衡、离心(4000转/分钟,15分钟);弃去上清液,保留rna沉淀。6. 洗涤与抽滤(1) 洗涤:取10ml 95%乙醇加到含rna沉淀的离心管中,悬浮沉淀,浸泡5分钟。(2) 抽滤:取大小合适的滤纸,先在数字显示天平上称重;然后放入布氏漏斗中,用少量乙醇湿润滤纸,开启真空泵,使滤纸贴紧漏斗,将沉淀及溶液全部转移至布氏漏斗内;再用15ml 95%的乙醇洗涤离心管,淋洗滤渣。7. 干燥用小镊子取出布氏漏斗中的沉淀物和滤纸,转移至表面皿上,置于80°c烘箱内干燥。8. 称重取出样品,在室温下冷却数分钟后,将沉淀物及滤纸置于数字显示天平上称重。9. 颜色反应(1) 溶解:取50ml水溶解rna沉淀,同时加2滴naoh助溶。颜色反应:取4支洁净、干燥的试管,按下表所示顺序操作