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人可溶性CD40配体(sCD40L)免疫组化试剂盒​操作步骤

人可溶性cd40配体(scd40l)免疫组化试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
baf53b肌动蛋白样蛋白6b抗体
ataxin 7脊髓小脑共济失调蛋白7抗体
phospho-c-abl (tyr70)磷酸化非受体激酶c-abl抗体
apba1β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(x11α)
apolipoprotein e载脂蛋白e抗体
afp甲胎蛋白afp抗体
ae2阴离子交换蛋白2抗体
aconitase 1铁调节蛋白1抗体
atad3a三磷酸腺苷酶家族蛋白3a抗体
apoj载脂蛋白j抗体
apoh载脂蛋白h抗体
art4二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体
akirin2akirin2蛋白抗体
arl8badp核糖基化样因子8b抗体
atad2三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体
akirin1akirin1蛋白抗体
asz1锚定蛋白样蛋白1抗体
adenylate kinase 2腺苷酸激酶2抗体
aim1l黑色素瘤缺失样蛋白1抗体
aer61未知糖基化转移酶aer61抗体
fe65铁蛋白fe65抗体
arhi抑癌基因ras同源家族1抗体
ap2 alpha转录激活蛋白2α/tfap2α/ap-2α抗体
anp心钠素抗体
aars2丙氨酰trna合成酶2抗体
akap12抑制蛋白激酶c底物抗体
alpha-synuclein核突触蛋白α抗体
apg4b自噬相关蛋白4b抗体
adamts12整合素样金属蛋白酶与1型-12抗体
alpha actinin 4-loading controlα-辅肌动蛋白4(内参)抗体
alkaline phosphatase碱性磷酸酶抗体
au1 tagau1 tag标签抗体
aebp1脂肪细胞增强结合蛋白1
akt1蛋白激酶b
akt1蛋白激酶b
angl2血管生成素样蛋白2抗体
angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗体
annexin i膜粘连蛋白 i抗体
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