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人抗皮肤抗体(ASA)酶联免疫分析试剂盒操作步骤

人抗皮肤抗体(asa)酶联免疫分析试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
溶血磷脂酰基转移酶5抗体agpat5 0.2ml
遗传性失明相关蛋白aipl1抗体aipl1 0.1ml
免疫调节蛋白aire抗体aire 0.2ml
磷酸化蛋白激酶akt1抗体phospho-akt1 (ser473) 0.1ml
磷酸化蛋白激酶akt1抗体phospho-akt1 (thr72) 0.1ml
磷酸化蛋白激酶akt1抗体phospho-akt1 (tyr326) 0.1ml
乙醛脱氢酶2型抗体aldh1a2 0.1ml
γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体aldh9a1 0.2ml
衰老相关蛋白5抗体agps 0.2ml
磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体phospho-alpha b crystallin (ser59) 0.1ml
釉基质蛋白抗体ambn 0.2ml
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体phospho-ampk alpha 2 (ser176) 0.1ml
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体phospho-ampk alpha 2 (ser491) 0.1ml
磷酸化雄激素受体抗体phospho-androgen receptor (ser515) 0.1ml
磷酸化雄激素受体抗体phospho-androgen receptor (ser791) 0.1ml
磷酸化雄激素受体抗体phospho-androgen receptor (ser94) 0.1ml
磷酸化雄激素受体抗体phospho-androgen receptor (tyr363) 0.1ml
锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ankk1抗体ankk1 0.2ml
磷酸化内收蛋白抗体phospho-alpha adducin (thr445) 0.1ml
膜粘连蛋白11抗体annexin a11 0.2ml
膜粘连蛋白13抗体annexin a13 0.2ml
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