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试验用试剂和培养基配方

**试验用试剂和培养基配方
1.磷酸盐缓冲液(pbs,0.03mol/l,ph7.2)
无水*2.83g
磷酸二氢钾1.36g
蒸馏水加至1000ml
将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中,待*溶解后,调ph至 7.2~7.4,于 121℃压力蒸气** 20min备用。
2.*
第1液:结晶紫溶液
结晶紫乙醇饱和溶液100ml
结晶紫4g~8g
95%乙醇100ml
1%草酸胺溶液
第2液:卢戈液
化钾 2g
1g
蒸馏水200ml
第3液:脱色剂
(1)95%乙醇
(2)丙酮乙醇溶液100ml
95%乙醇70ml
丙酮30ml
第4液:稀释石炭酸复红液
碱性复红乙醇饱和溶液10ml
碱性复红5g~10g
5%石炭酸溶液90ml
蒸馏水900ml
3.孔雀绿与沙黄芽孢染色液
第1液5.0%孔雀绿水溶液
第2液0.5%沙黄水溶液
4.无菌检验用洗脱液
吐温-801g
蛋白胨10g
氯化钠8.5g
蒸馏水1000ml
将各成分加入到 1000ml 0.03mol/l pbs液中,加热溶解后调ph至 7.2~7.4,于121℃压力蒸汽**20min备用。
5.标准硬水(硬度342mg/l)
氯化钙(cacl2)0.034g
氯化镁(mgcl2·6h2o)0.139g
蒸馏水加至1000ml。
6.有机干扰物
牛血清白蛋白30g
蒸馏水1000ml
溶解后用微孔滤膜(孔径为0.45μm)滤过**,冰葙保存备用。
7.营养琼脂培养基
蛋白胨10g
牛肉膏5g
氯化钠5g
琼脂15g
蒸馏水1000ml
除琼脂外其他成份溶解于蒸馏水中,调ph至 7.2~7.4,加入琼脂,加热溶解,分装,于121℃压力蒸汽**20min备用。
8.营养肉汤培养基
蛋白胨10g
牛肉膏5g
氯化钠5g
蒸馏水1000ml
将各成分溶解于蒸馏水中,调ph 至7.2~7.4,分装,于121℃压力蒸汽**20min备用。
9.稀释液:胰蛋白胨生理盐水溶液(tps)。
胰蛋白胨1.0g
氯化钠8.5g
先用900ml以上蒸馏水溶解,并调节ph值在7.0±0.2,*终用蒸馏水加至1000ml,分装后,经121℃压力蒸汽**后使用。
10.胰蛋白胨大豆肉汤培养基(tsb)
胰蛋白胨 1.5%
大豆蛋白胨 0.5%
氯化钠 0.5%
用蒸馏水配制而成,调节ph为7.2±0.2,经121℃压力蒸汽**后使用。
11.胰蛋白胨大豆琼脂培养基(tsa)
胰蛋白胨 1.5%
大豆蛋白胨 0.5%
氯化钠 0.5%
琼脂 1.6%
用蒸馏水配制而成,调节ph为7.2±0.2,经121℃压力蒸汽**后使用。
12.品红亚硫酸钠培养基
蛋白胨10g
酵母浸膏5g
牛肉膏5g
乳糖10g
琼脂15g~20g
*3.5g
无水亚硫酸钠5g
5%碱性品红乙醇溶液20ml
蒸馏水1000mg
以上各成分蒸馏水溶解,调ph 至7.2~7.4,装瓶,经121℃压力蒸汽**后使用。
13.溴甲酚紫蛋白胨培养液
蛋白胨10g
葡萄糖5g
可溶性淀粉1g
溴甲酚紫乙醇溶液10ml
蒸馏水1000ml
将蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸馏水中,调ph 至 7.0~7.2,加入2% 溴甲酚紫酒精溶液,摇匀后,分装(每管5ml),并放入一个小倒管,于 115℃压力蒸汽**30min。置4℃冰箱备用。
14.嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基
蛋白胨10g
牛肉膏3g
可溶性淀粉1g
葡萄糖1g
琼脂20g
蒸馏水1000ml
以上各成分蒸馏水溶解,调ph 至7.0~7.2,装瓶,经115℃压力蒸汽**30min后使用。
15.需氧-***琼脂培养基
酪胨(*水解)15g
牛肉膏3g
葡萄糖5g
氯化钠2.5g
l-*0.5g
硫乙醇酸钠0.5g
酵母浸出粉5g
新鲜配制的 0.1% 刃天青溶液1.0ml
(或新配制的 0.2% *溶液0.5ml
琼脂0.5g~0.7g
蒸馏水1000ml
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成份加入蒸馏水中,微温溶解后,调 ph 至弱碱性,煮沸、滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调 ph 至 6.9~7.3,分装于 115℃压力蒸汽** 30min。
16.沙堡琼脂培养基
葡萄糖40g
蛋白胨10g
琼脂20g
蒸馏水1000ml
将上述成分混合后,加热至*溶解,调ph 至5.6±0.2,于 115℃压力蒸汽** 30min备用。
17.沙堡液体培养基
葡萄糖40g
蛋白胨10g
蒸馏水1000ml
将上述成分混合后,加热至*溶解,调ph 至5.6±0.2,于 115℃压力蒸汽** 30min备用。
18.无菌试验用**培养基
磷酸二氢钾(kh2po4)1g
*(mgso4·7h2o)0.5g
蛋白胨5g
葡萄糖10g
蒸馏水1000ml
除葡萄糖外,上述各成分加入蒸馏水内,微温溶解后,调节ph 约6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,摇匀滤清,调ph 使**后为6.4±0.2,分装,115℃压力蒸汽**20min备用。
19.人**细胞维持培养基
1640干粉培养基10×10.4g
l*2.93g
丙酮酸钠1.004g
*80万单位
*100万单位
*20.0g
hepes23.9g
去离子水加至10000ml
除*、*外,其余各成分溶于蒸馏水中,调ph至7.0~7.2,115℃压力蒸汽**20min备用。临用前加入无菌*、*溶液。
20.人**细胞*培养基
在人**细胞维持培养基中加入10%无菌小牛血清。
21.*
营养琼脂100ml
脱纤维羊血(或兔血)10ml
将营养琼脂加热熔化待冷至50℃左右,以无菌操作将10ml 脱纤维血加入后摇匀,倒平皿置冰箱备用。
22.霉菌培养基
胨 5g
葡萄糖10g
磷酸二氢钾1g
氯化钠5.0g
*0.5g
蒸馏水1000ml
除葡萄糖外,取上述成份加入蒸馏水中,微温溶解后,调 ph 至6.0 ,煮沸,加入葡萄糖溶液后,摇匀,滤清,调 ph 至 5.6~6.0,分装于 115 ℃压力蒸汽**30min。
23. scdlp液体培养基
酪蛋白胨17g
大豆蛋白胨3g
葡萄糖2.5g
氯化钠5g
*2.5g
*1g
吐温807g
蒸馏水1000ml
将各种成份混合(如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨可用日本多胨代替),加热溶解后,调ph 至 7.2~7.3,分装于121℃压力蒸汽**20min,摇匀,冷至 25℃使用。
24.伊红*培养基
蛋白胨10g
乳糖10g
磷酸二氢钾2g
2%伊红溶液2ml
0.65%*溶液 1ml
琼脂17g
蒸馏水1000ml
将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,调ph 至 7.1,分装于121℃压力蒸汽**20min。临用时,以无菌操作加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至 50℃时,加入伊红和*溶液摇匀,倒平皿置4℃冰箱备用。
25. 0.5% *
胨10g
氯化钠5g
葡萄糖5g
肉浸液1000ml
取胨与氯化钠加入肉浸液内,微温溶解后,调ph 至弱碱性,煮沸、加入葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调 ph 至7.0~7.4,分装,于115℃压力蒸汽**30min。
26. *培养基
蛋白胨10g
牛肉膏5g
氯化钠5g
*10g
0.2%溴*蓝溶液 12ml
蒸馏水1000ml
将蛋白胨、氯化钠、牛肉膏加入蒸馏水中,加热溶解,调 ph 至7.4,加入*和溴*蓝混匀后,分装,于 115℃压力蒸汽**20min。
27. 乳糖胆盐发酵管
蛋白胨20g
猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml
蒸馏水1000ml
将蛋白胨、胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中,调ph 至 7.4,加入0.04% 溴甲酚紫水溶液,分装(每管10ml),并放入一个小倒管,于 115℃压力蒸汽**15min。
28. 乳糖发酵管
蛋白胨20g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml
蒸馏水1000ml
将蛋白胨及乳糖溶解于蒸馏水中,调ph 至 7.4,加入0.04% 溴甲酚紫水溶液,分装(每管10ml),并放入一个小倒管,于 115℃压力蒸汽**15min。
29.1%苋菜红
苋菜红 1%
西曲溴胺 0.05%
30.mea培养基
麦芽浸膏 30g
大豆蛋白胨 3g
琼脂15g
双蒸水加至 1000ml
将上述成份制成溶液于121℃下**15mln,**后无菌调ph至5.6±0.2备用。
31.meb肉汤
麦芽浸膏 20g
双蒸水加至 1000ml
将上述成份制成溶液于121℃下**15mln,**后无菌调ph至6.9±0.2备用。
32.注意事项
(1)双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其它成分为乳糖胆盐发酵管的2 倍;3倍浓缩乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其它成分为乳糖胆盐发酵管的3倍。
(2)配制培养基的容器不宜用铜锅或铁锅,以免影响**生长。
(3)培养基用的试管口和三角烧瓶口应用普通棉花制成的棉塞,再用牛皮纸包好。
(4)试剂与培养基配制好后应置清洁处保存,常温下不超过1 个月。
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