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茁彩生物ㅣBCA法测定蛋白质浓度

bca(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的 试剂 ,混合一起即成为苹果绿,即bca工作试剂。在碱性条件下,bca与蛋白质结合时,蛋白质将cu2+ 还原为cu+ ,一个cu+ 螯合二个bca分子,工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。
优缺点
1. 操作简单,快速,45分钟内完成测定,比经典的lowary法快4倍且更加方便;
2.准确灵敏,试剂稳定性好,bca试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml
3.经济实用,除 试管外,测定可在微板孔中就进行,大大节约样品和试剂用量;
4.抗试剂干扰能力比较强,如去垢剂,尿素等均无影响
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