一、划线获得单个菌落的办法，如果划不出单个菌落，可能是因为：
1. 平板上有过多的水分
2. 划线时接种环未经重复灼烧
3. 多区划线，三区或四区划线
二、涂布和倾泻的差异：
1. 涂布利于调查，但由于涂布棒上会带有少数的菌液，影响计数的准确性。
2. 涂布更为准确，但不利于调查菌落的状况。
三、提醒您，培养基时应留意：
1. 灭菌温度要严格控制，依照请求灭菌，特别含糖量较高的温度不应太高，过高会致使糖分焦化，影响质量。
2. 不能重复灭菌，重复灭菌也会致使营养成分的损坏。
3. 含琼脂的灭菌后要摇匀。
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