犬肌钙蛋白ielisa检测试剂盒试剂配制:
1、犬肌钙蛋白ielisa检测试剂盒说明书酶联板(assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(sample diluent):1×20ml/瓶。
4、标记抗体稀释液(biotin-antibody diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (hrp-avidin diluent):1×10ml/瓶。
6、标记抗体(biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(hrp-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(tmb substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(wash buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(stop solution):1×10ml/瓶(2n h2so4)。
当钙离子浓度升高到一定程度时, tnc与钙离子结合,导致其构型发生改变,并将此效应传递到肌钙蛋白,tni的构型随之发生改变,与肌动-原肌球蛋白脱离,抑制作用被解除,横桥atpase被激活,细肌丝发生滑动,肌肉表现出收缩性。所提供的elisa kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂(elisa)。预先包被的犬ctni抗体为多克隆犬ctni抗体。检测相犬ctni抗体也为多克隆犬ctni抗体,经生物(biotin)标记。样品和生物标记犬ctni抗体先后加入酶标板孔反应后,pbs或tbs洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过pbs或tbs的*洗涤后用底物tmb显色。