甘油三酯(tg)elisa检测试剂盒（单试剂微板法） 甘油三酯(tg)elisa检测试剂盒
ps1087 甘油三酯(tg)检测试剂盒 gpo-pad单试剂微板法 (psaitong)保存条件：-20℃ 避光 6个月产品描述：产品简介
甘油三酯(triglyceride，tg)又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，用酶学方法测定 tg 是生化检测中的常用方法， 其特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。
本公司甘油三脂(tg)检测试剂盒(gpo-pap 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其原理是甘油三脂被 lpl 水解为甘油和脂肪酸，后者经甘油激酶和 atp 磷酸化，g-3-p 被磷酸甘油氧化酶(gpo)氧化并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(pod)催化，使 4-氨基安替比林与酚(三者合称 pap)反应，生成红色benhun醌亚胺(trinder 反应)，酶标仪在 500~520nm 处进行比色测定，用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
组分：
名称 规格 储存
试剂(a): gpo-pap工作液 good's buffer
30ml
-20℃ 避光
lpl、gk、gpo
过氧化物酶(pod)
4-氨基安替比林
对氯酚
试剂(b): glycerol 标准(1.7mmol/l) 1ml 4℃ 避光
试剂(c): ddh2o 1ml
rt
自备材料:
1、生理盐水或pbs。
2、96 孔板或离心管、小试管。
3、水浴锅或恒温箱。
4、酶标仪或分光光度计。
5、全自动或半自动生化分析仪。
操作步骤(仅供参考)：
一、样本处理
1、血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。
2、细胞样本
a:取适量的细胞(一般推荐＞106以上)，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
b:.用 pbs 或生理盐水清洗 1-2 次，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
c:加入200-300μl 的pbs或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300w，每次3-5s，间隔30s,重复3-5次；亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心；亦可用1-2% triton x-100 冰浴 30-60min，制备好的裂解液不可离心。
3、组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或pbs(ml)=1：9的比例，加入生理盐水或pbs，冰浴条件下手动或机械匀浆，2500-3000g 离心10min，取上清待用。
二、酶标仪tg测定操作:
1：按下表依次加入试剂：
加入物(μl) 空白孔 标准孔 待测孔
ddh2o 3 - -
glycerol 标准(1.7mmol/l) - 3 -
待测样本 - - 3
gpo-pap 工作液 300 300 300
2：充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3：酶标仪测定 500-520nm 吸光度，以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。
三、分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 tg 测定操作：
1、按下表依次加入试剂：
加入物(ml) 空白管 标准管 待测管
ddh2o 0.01 - -
glycerol 标准(1.7mmol/l) - 0.01 -
待测样本 - - 0.01
gpo-pap 工作液 1 1 1
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度，空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
四、普通分光光度计(2ml比色杯)tg 测定操作:
1、按下表依次加入试剂：
加入物(ml) 空白管 标准管 待测管
ddh2o 0.02 - -
glycerol 标准(1.7mmol/l) - 0.02 -
待测样本 - - 0.02
gpo-pap 工作液 2 2 2
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、分光光度计测定500-520nm吸光度，空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
五、全自动生化分析仪 tg 测定操作:
1、按下表依次加入试剂：
加入物((μl) 空白管 标准管 待测管
ddh2o 3 - -
glycerol 标准(1.7mmol/l) - 3 -
待测样本 - - 3
gpo-pap 工作液 300 300 300
2、充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
3、全自动生化分析仪测定 500-520nm 波长处吸光度，以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
机器参数：
主波长/次波长 500/600nm
反应类型 终点法
反应方向
升反应(+)
计算公式：
血清、血浆等液体样本(空白调零)：
tg(mmol/l)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×1.7mmol/l
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)：
tgmmol/l)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/l
细胞、组织等样本(空白调零)：
tg(mmol/l)=｛ ( 待 测 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 标 准 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) ｝×1.7mmol/l÷待测样本浓度(mg/ml)
细胞、组织等样本(全自动生化分析仪)：
tg(mmol/l)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/l÷待测样本浓度(mg/ml)
参考区间：
健康成年人：
理想范围：＜1.7mmol/l(＜150mg/dl)
边缘升高：＜1.7-2.25mmol/l(150-199mg/dl)
升高：＜2.26-5.64mmol/l(200-499mg/dl)
很高：≥565mmol/l(≥500mg/dl)
性能指标：
外观 无色至淡黄色澄清液体
线性范围 0.05-9.0mmol/l(4~790mg/dl)，r2>0.98
灵敏度 检测下限 0.05mmol/l(4mg/dl)
变异系数 批内<5%，批间<8%，总误差<10%
空白吸光值 <0.2(1cm 光径)
干扰因素 胆红素<205μmol/l；血红蛋白<6g/l；edta、肝素抗凝时，对结果无明显影响。
稳定性
密闭，6个月
注意事项：
1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于检测脑脊液中的tg含量，但不能直接检测尿液中的tg含量，因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。
3、待测样本如不能及时测定，应置于2-8℃保存，3天内稳定。
4、本法线性范围可达9.0mmol/l，如果样本tg浓度过高，结果可能呈假性降低，应用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
有效期： -20℃ 避光， 6个月有效。