nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）试剂盒商品货号：qs1003
英文名称：nadp-malate dehydrogenase（nad-mdh）assay kit
别名：nadp-苹果酸脱氢酶试剂盒 nadp-mdh kit nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）试剂盒 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒
检测方法：常量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
qs1003-50管/48样 50管/48样 ￥320.00元
产品详细介绍
测定意义：
mdh （ec 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中mdh是tca循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中mdh催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，mdh在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，mdh分为nad-依赖的mdh和nadp-依赖的mdh， nadp-mdh主要存在于真核细胞中。
测定原理：
nadp-mdh催化nadph还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
产品说明书
货号: qs1003 规格：50 管/48 样
nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）试剂盒说明书 紫外分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
mdh （ec 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中 mdh 是 tca 循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中 mdh 催化草酰乙酸形成苹果酸。 草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，mdh 在细胞多种生理活动中 扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病 性等。根据不同的辅酶特异性，mdh 分为 nad-依赖的 mdh 和 nadp-依赖的 mdh， nadp-mdh 主 要存在于真核细胞中。
测定原理：
nadp-mdh 催化 nadph 还原草酰乙酸生成苹果酸，导致 340nm 处光吸收下降。
自备实验用品及仪器：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 ml 石英比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一: 提取液 60 ml×1 瓶，在 4℃保存；
试剂二: 液体 50 ml×1 瓶，在 4℃保存；
试剂三: 粉剂×2 支，-20℃保存；临用前加入 300μ l 蒸馏水；用不完的试剂分装后-20℃ 保存，禁止反复冻融。
试剂四: 粉剂×2 支，-20℃保存；临用前加入 300μ l 蒸馏水；用不完的试剂分装后-20℃ 保存，禁止反复冻融。
样本测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 试剂一），超 声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200w，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃ 离心 10min，取上清置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1ml 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2、将试剂二在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。
3、操作表：
试剂名称（μ l） 测定孔
样本 20
试剂二 760
试剂三 10
试剂四 10
将上述试剂按顺序加入 1 ml 石英比色皿中，混匀后立即在 340 nm 波长下记录初始吸光度 a1 和反应 1min 后的吸光度 a2，计算 δ a=a1-a2。
注意：若 a1-a2 大于 0.5，需将样本用提取液稀释，使 a1-a2 小于 0.5，可提高检测灵敏度。 计算公式中乘以相应稀释倍数。
nadp-mdh 活力单位的计算：
1、血清（浆）nadp-mdh 活力的计算
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟消耗 1 nmol 的 nadph 定义为一个酶活力单位。
nadp-mdh（nmol/min/ml）=[δa×v 反总÷（ε ×d）×109 ]÷v 样÷t=6430×δa
2、组织、细菌或细胞中 nadp-mdh 活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 nadph 定义为一个酶活力单位。
nadp-mdh （ nmol/min/mg prot ） =[δa×v 反 总 ÷ （ ε ×d ） ×109 ]÷(v 样 ×cpr) ÷t=6430×δa÷cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每 g 组织每分钟消耗 1 nmol 的 nadph 定义为一个酶活力单位。
nadp-mdh（nmol/min/g 鲜重）=[δa×v 反总÷（ε ×d）×109 ]÷（w ×v 样÷v 样总）÷t =6430×δa÷w
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟消耗 1 nmol 的 nadph 定义为一个酶活力单位。
nadp-mdh（nmol/min/104 cell）=[δa×v 反总÷（ε ×d）×109 ]÷（v 样÷v 样总×500） ÷t=12.86×δa
v 反总：反应体系总体积，8×10-4 l；ε：nadph 摩尔消光系数，6.22×103 l / mol /cm；d： 比色皿光径，1cm；v 样：加入样本体积，0.02 ml；v 样总：加入提取液体积，1 ml；t：反应 时间，1 min；w：样本质量，g；cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；500：细胞或细菌总数，500 万。
系列产品及单价
辅酶ⅰ系列 　 　 　 　
qs1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 500
ms1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 920
qs1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 可见分光光度法 50管/24样 170
ms1001 乳酸脱氢酶（ldh）测试盒 微量法 100管/48样 330
qs1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1002 nad-苹果酸脱氢酶（nad-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1003 nadp-苹果酸脱氢酶（nadp-mdh）测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）测试盒 微量法 100管/96样 850
qs1005-50 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 3200
qs1005-25 柠檬酸合酶(cs）测试盒 可见分光光度法 25管/24样 2000
ms1005 柠檬酸合酶(cs）测试盒 微量法 100管/48样 3500
qs1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 720
ms1006 丙酮酸脱羧酶（pdc）测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1007 醇脱氢酶（adh）测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 800
ms1008 单脱氢抗坏血酸还原酶（mdhar）测试盒 微量法 100管/96样 1550
qs1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 420
ms1009 乙醛脱氢酶（aldh）测试盒 微量法 100管/96样 800
qs1010 nad激酶（nadk）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 600
ms1010 nad激酶（nadk）测试盒 微量法 100管/48样 1100
qs1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 紫外分光光度法 25管/24样 1280
ms1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒 微量法 100管/96样 2500
产品说明书