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人Dectin-1蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤

人dectin-1蛋白elisa检测试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
人乳腺癌细胞;mcf 7b
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;molt-4
人小细胞肺癌细胞;nci-h209
黑人burkitt淋巴瘤细胞;raji
人b淋巴细胞瘤细胞;ramos
人b淋巴细胞瘤细胞;ramos(ra.1)
人脑瘤细胞;sf126
人脑瘤细胞;sf763
人脑瘤细胞;sf767
人皮肤黑色素瘤细胞;sk-mel-1
人肾上腺皮质癌细胞;sw-13
人结直肠癌细胞;t84
人急性单核细胞白血病细胞;thp-1
人神经胶质细胞瘤细胞;u251
人组织细胞淋巴瘤细胞;u937 [u-937]
人胃腺癌细胞;bgc-823
人低分化肺腺癌细胞;glc-82 [glc82]
人喉癌上皮细胞;hep-2
人纤维肉瘤细胞;ht-1080
人绒癌细胞;jeg-3
人耐vp16绒癌细胞株;jeg-3/vp16
白介素-2转染耐vp16绒癌细胞;jeg-3/vp16-il-2
tnfa转染耐vp16绒癌细胞;jeg-3-vp16-tnfa
人急性t淋巴细胞白血病细胞;jurkat, clone e6-1
人神经母细胞瘤细胞;be(2)-m17
人乳腺癌细胞;mda-mb-157
人成骨肉瘤细胞;mg-63
人小细胞肺癌细胞;nci-h446
人多发性骨髓瘤细胞;rpmi-8226 [rpmi8826]
人脑瘤细胞;sf17
人乳腺癌细胞;sk-br-3
人神经母细胞瘤细胞;sk-n-sh
人肝癌细胞;smmc-7721
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