ⅰ、干细胞样品准备
准备以下一种或几种样品
a、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)
b、组织培养细胞
c、ficoll-hypaque分离的单核细胞
ⅱ、干细胞反应体系-dna低渗缓冲液
柠檬酸三钠 0.25g triton-x 100 0.75ml propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸馏水 250ml
我们将该dna低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失
ⅲ、染色
1、 每一个管子中放入1×106个细胞;
2、 样品离心后尽可能*地移去上清液，并且不要打碎沉淀块;
3、 入1ml的dna低渗染色缓冲液至沉淀中，并混匀;
4、 样品于4℃下避光30分钟或zui长不超过1个小时以备流式干细胞仪分析。