细胞：mcecs细胞
中文名称：人小鼠心脏内皮细胞
生长特性：贴壁
培养基：dmem-h培养基 血清：10%fbs（gibco胎牛血清）
冻存条件：50%基础培养基、40% fbs、10% dmso
细胞传代：
1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，pbs缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25%yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。
2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4）：注意培养基ph值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
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目的应用双哌达莫(dpm)、腺苷(ado)与ado拮抗剂(th)治疗博莱霉(ble)肺纤维化小鼠,观察肺、脾等病理变化,探讨肺纤维化发病机理.
方法:
实验第1天100只小鼠经气管注入ble 8.5 mg*kg-1,随机分ble、dpm、ado和th四组；
第2天起分别给予ns(100μl*d-1)、dpm、ado和th,剂量均为50mg*kg-1*d-1,共7天；
第4～30天内chu死动物,组织化学法观察肺内纤维变化与脾、胸腺、骨髓病理学改变.
结果:
ble组和th组第4～6天脾、胸腺髓质与骨髓中许多基质细胞huai死导致组织严重疏松。
ble组第20天后脾与胸腺逐渐weisuo,肺与脾内网状纤维大量增加。
dpm组与ado组第4～6天脾、骨髓坏死基质细胞较少,第30天肺未发生纤维化,淋巴器官未weisuo.
结论:
ble能致脾、骨髓等基质细胞大量huai死与严重组织疏松.内、外源性ado能轻度减少基质细胞huai死,促进淋巴组织与造血组织增生,抑制ble诱导的肺纤维化与淋巴器官weisuo.
关键词：培养箱