实验室里大家都埋头做实验,可为什么老板每次都骂我们,你都快 30 的人了这也不会那也不会,白长这么大了,栽培了你那么多年到头来啥也指望不上。对此,我深感委屈,那个细胞我养了那么久,它还是那样衣来伸手饭来张口,我有怪过谁么?
首先,这么大的细胞了,除了要自己学会传代之外,鄙人对你们还有更高的要求,你该学会自己做实验了。
非常好,你能区分什么时候需要构建稳转株吗?
细胞:需要构建稳转株的,有这些类型:
1. 长期在目的细胞中研究基因功能;
2. 部分蛋白半衰期极长,瞬时 rna 只能干扰表达,无法去除已经表达的目的蛋白,想要实现更好的基因干扰效果;
3. 想要实验更,筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究;
4. 需要用诱导表达系统的,主要是一些致死基因或者是需要时空表达的;
5. 需要用细胞做动物实验的,比如裸鼠成瘤等。
以下实验就不需要构建稳定株:
1. 希望迅速观察目的基因过表达或者干扰效果;
2. 2~4 天的瞬时表达已经可以达到具体的实验目的,比如检测两个外源转染的目的蛋白之间的相互作用;
3. 细胞个体差异对实验结果有影响。