q：jetprime®是哪种类型的化合物？
a：jetprime®是由polyplus-transfection®公司合成的zhuan利产品，一种新型的基于阳离子聚合物的分子。
q：使用jetprime®进行转染时，质粒是如何导入的？
a：jetprime®和dna形成带正电荷的复合物。这些复合物通过内吞作用进入细胞。随后经质子海绵作用，内涵体在细胞质中释放dna。当有丝分裂过程中核膜消失时，质粒大多到达细胞核。
q：我的细胞比较脆弱，无血清时不能生长。我可以尝试在有血清的条件下进行转染吗？
a：与许多其他转染试剂相反，在有血清的环境下，jetprime®的效率更高。因此，转染复合物可以直接加到含血清培养基的细胞中。
无血清培养基：opti-mem培养基（thermo）
lipo2000,转染时需要更换培养为opti-mem;需要用opti-mem复合物,转染6小时后需要换液。对细胞毒性大。
lipo3000,转染时需要更换培养为opti-mem;需要用opti-mem复合物,转染6小时后无需换液。跟lipo2000相比，毒性小。
抗生素问题：
jetprime®的转染效率不受抗生素的影响。jetprime的常规批次质检都是在含血清和抗生素的培养基中进行的。
细胞密度问题：
细胞密度和传代次数将影响转染效率。推荐细胞融合度在60%-80%。对于使用jetprime的转染优化条件，请参考jetprime®转染说明书中的table 1，根据不同培养板推荐的细胞数。此外，如果细胞已经培养很长时间（超过20代），建议从液氮中取新的细胞重新培养。
比值问题：
q：dna/jetprime®的比值是什么意思？
a：该比值指的是每微克（ug）dna相对应的jetprime微升数（ul）。例如，dna/jetprime®比值为1：2意思是每ug dna加2uljetprime.
优化的问题：
优化的第一步是将dna的量增加1.5倍。推荐增加dna/jetprime®比值(每ug的dna，2-3uljetprime®),另一种方法是缓慢离心培养板（5min，210g）
扩大的问题：
一般来说，dna的量应该和总细胞数成比例。参考jetprimeprotocol中的推荐，根据不同规格的培养皿，所需要的dna和jetprime的量（table 2）
细胞特异性问题：
q：对于所有细胞可以使用同样的条件吗？
a：已优化的操作步骤可用于多种细胞，例如a549, mcf7,u2os, nih-3t3, b16-f10, caco-2等。更多细胞的优化条件，请咨询客服!
hek-293和hela细胞问题：
q：hek-293和hela细胞：是否可以提供使用jetprime转染hek-293和hela细胞的具体建议？
a：jetprime对于dna转染hek-293和hela细胞都是非常高效的。因此，推荐减少dna的量（例如6孔板，每孔1ug-0.5ug），使用1：2的dna和jetprime比例。
悬浮细胞问题：
q：jetprime®推荐用于悬浮细胞的dna转染吗？
a：悬浮细胞，例如t和b淋巴细胞是众suo周知的难转染dna细胞，无论哪种化学方法的试剂都很难有较好的转染效率。因此，通常推荐电转或者病毒转染核酸到悬浮细胞。
植物细胞问题：
q：jetprime®是否测试过可以用于植物细胞的转染？
a：植物细胞富含纤维素的膜阻止了jetprime/dna复合物进入细胞。甚至在脱去纤维素的原生质体阶段，复合物也无法穿透进入细胞质。
huvec(人脐静脉内皮细胞)问题：
q：jetprime®对huvec的dna转染是否有效？
a：对于huvec细胞，推荐使用jetpei®-huvec，专为该细胞的dna转染设计的特异性转染试剂。可以用jetoptimus替代。
原代神经元问题：
q：对于原代培养的神经元，可以使用jetprime®吗？
a：神经元很难转染，主要是因为其在培养的过程中不分裂。然而，jetpei®已被成功用于神经元的体外转染。
巨噬细胞问题：
q：对于dna转染巨噬细胞，jetprime的转染效率如何?
a：jetprime已成功用于raw264.7的转染。按照standard condition,可以获得50%的转染效率；对于原代巨噬细胞或单核细胞、巨噬细胞衍生的巨噬细胞的dna转染，应选择jetpei-macrophage。可以用jetoptimus替代
质粒共转染问题：
q：当我想在一个实验中进行多个质粒的共转染时，我该如何操作？
a：对于多个质粒的转染，每孔dna的总量不应超过说明书中标明的dna量。每个质粒的比例根据质粒的大小、结构和期望的每个质粒的表达水平来应用。在每孔中，每个质粒至少应占总dna量的10%。
复合物问题：
q：jetprime®/dna复合物可以稳定多长时间？
a：复合物形成的15-30分钟内是获得最佳转染效率的时间。因此，对于需要较长孵育时间的高通量筛选，推荐使用jetpei进行hts,因为jetpei®/dna复合物可以稳定长达4小时。
病毒包装问题：
q：jetprime®是否适用于病毒包装？
a：jetprime®可以用在传统培养基中进行病毒包装。实际上，在用于病毒包装的常规细胞中，使用jetprime®的转染效率可达90%，例如hek-293及其衍生株，cho, vero,wop和bhk细胞，因此会产生高病毒滴度（dewannieux,m., vernochet, c., bartoscho, b., cosset, f.l., heidmann, t (2011).the mouseiape endogenous retrovirus can infect cells through any of the fivegpi-anchored ephrin a proteins., plos pthog 7, e1002）.
细胞活性问题：
q：如何提高脆弱细胞的细胞活性（例如，原代成纤维细胞）？
a：转染对于细胞来说是创伤事件。改进细胞活性，可参考以下建议：
-转染后4小时更换培养基
-减少dna的量
-减少jetprime®的体积
-在含血清的培养基中进行转染
-转染后24小时分析转染效率而不是48小时
-确保使用jetprime®buffer稀释jetprime和dna
-检测质粒不含内毒素
质粒大小问题：
q：使用jetprime®做dna转染会有质粒大小的限制吗？
a：使用jetprime®做dna转染没有质粒大小的限制。然而，记住同样的dna量，大质粒的基因拷贝数比小质粒少。
sirna问题:
q：可以使用jetprime®转染sirna吗？
a：jetprime®完quan可以用于sirna转染，使用终浓度10-50nm的sirna。然而，如果您主要感兴趣的是sirna转染，那么试剂interferin®是您的选择。
保存问题：
q：jetprime®如何保存？
a：jetprime®是稳定的分子。室温运输jetprime®和它的buffer，为长期保存，应储存在4°c。
加热问题：
q：当我收到jetprime®试剂时，管子完quan是温的。它是否仍然有效，能否继续使用？
a：jetprime®是非常稳定的分子。已经做了测试jetprime试剂稳定性的实验。jetprime®在50°c放置48小时后，仍表现出和保存在4°c时相似的转染效率。
冷冻问题：
q：我不小心冻存了我的jetprime®试剂，我该怎么办？
a：jetprime®可以耐受偶尔的冷冻，而不影响转染效率。然而，对于长期保存来说，建议分装并储存在4°c，以确保试剂长时间有效。
有效期问题：
保存适当时，jetprime®cat#114-01 (0.1ml)可以保存6个月。其他规格的jetprime®至少可以保存1年。
参考文献问题：
q：我在哪里可以找到科研人员已成功使用jetprime®发表的文章？
a：在polyplusproduct citation database,可以找到引用jetprime和polyplus-transfection公司其他试剂的科研论文。
更多有关polyplus转染试剂jetprime®产品问题，请联系polyplus转染试剂jetprime®代理商——天津益元利康生物科技有限公司：