目的:建立*中的芦丁含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法(uv)测定满山红总黄酮中主要成分芦丁的含量。结果:芦丁在浓度0.012~0.030mg/ml范围内呈良好的线性关系。回归方程y=0.04825 26.617x,相关系数r=0.9995。结论:所建立的方法简便快速,成本低,结果准确可靠,可作为本制剂质量控制方法。
【关键词】@*芦丁紫外分光光度法
*是由满山红、满山红总黄酮、桔梗提取物、*等4味中药经适宜的工艺提取制成的胶囊,具有止咳去痰之功效。临床上用于急慢性气管炎、咳嗽的治疗。为了有效的控制制剂的内在质量,确保其临床疗效,本实验对该制剂利用uv法对满山红总黄酮中主要成分芦丁进行含量测定,结果准确可靠,重现性好,可用于本制剂的质量控制。
1实验材料
1.1仪器uv6010型紫外分光光度仪(上海安捷伦公司);ag245型电子分析天平(精密度:1/10万)。
1.2对照品芦丁:购自中国药品生物制品检定所,批号为0809303,供含量测定用。
1.3试剂甲醇和其他试剂均为ar级。
2方法与结果
2.1测定波长的选择对照品溶液和供试品溶液在200~700nm进行扫描,均在420nm处有zui大吸收峰,不含满山红总黄酮药材的阴性对照溶液在420nm处无吸收峰,故试验选择测定波长为420nm。
2.2对照品溶液的制备精密称取干燥恒重芦丁对照品适量,加60%乙醇制成每1ml含0.06mg的溶液,即得。
2.3供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物10粒,倾出内容物,取0.2g精密称定,加以稀硫酸调ph值约为4.0的90%乙醇液50、30、20ml,加热回流提取3次,每次提取30min,放冷,移入100ml量瓶中,用ph值约为4.0的90%乙醇液稀释至刻度,备用。
2.4标准曲线的制作精密量取标准储备液(含芦丁60μg/ml)2.0、3.0、3.5、4.0、5.0ml,分别置10ml量瓶中,各加0.1mol/l三氯化铝溶液2ml,0.1mol/l*溶液3ml,加60%乙醇液稀释至刻度,摇匀,放置30min,同时作空白。照分光光度法[1],在420nm的波长处测定吸收度,绘出吸收度-浓度的关系曲线。浓度在0.012~0.030mg/ml,范围内呈良好的线性关系。回归方程y=0.04825 26.617x,相关系数r=0.9995。见表1。
表1标准曲线(略)
2.5精密度试验精密量取同一供试品溶液(批号20040702),连续测定,测定5次,求得rsd为0.85%。
2.6稳定性试验精密量取对照品溶液适量,按2.1.4项下方法,取同一供试品溶液(批号20040701),每隔30min重复测定1次,后测定其吸收度计算rsd=0.178%,结果表明,芦丁溶液在2h内稳定。
2.7重现性试验取同一批样品(批号20040701),按含量测定项下方法操作,独立测定5次,结果见表2。
表2重现性试验(略)
2.8样品含量测定吸取供试品溶液,在420nm处测定吸收度,按当日标准曲线计算,结果见表3。
表3样品中芦丁含量测定结果(略)
2.9加样回收率试验精密称取己知含量的样品(批号20040701,含量为13.74mg/粒,即68.70mg/g,平均粒重0.200g),准确加入芦丁对照品约7mg,精密称重,依法测定,计算回收率,见表4。
表4回收率试验(略)
3小结
以芦丁含量为指标对*进行定量鉴别,方法快捷、结果准确可靠[26],可作为本制剂质量控制重要环节,这一方法经过验证可有效地控制药物质量,为大生产提供理论检测依据[78]。