人肿瘤坏死因子α高敏 elisa 试剂盒实验样品收集:
1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂*使用edta-na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
4.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 具体处理方法可参考:
5.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
6.组织匀浆:用预冷的pbs (0.01m, ph=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会 影响测量结果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的pbs(一般按1:9的重量体 积比,比如1g的组织样品对应9ml的pbs,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。 *在pbs中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组 织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟, 取上清检测。
7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻 存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。
8.如果您的样品中检测物浓度高于标准品zui高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先 做预实验,以确定稀释倍数)。