免疫组化双染技术是常用的免疫组化方法之一,它可以通过使用两种不同种属的一抗、两种不同种属的二抗系统和不同颜色的显色系统,同时检测组织切片中两种或多种抗原的表达情况。那么,目前常用的双染显色系统有什么呢?让我们一起来看看吧!
一、辣根过氧化物酶(hrp)检测系统
辣根过氧化物酶(hrp)是一种能将过氧化氢(h2o2)分解为氧气(o2)和水(h2o)的过氧化物酶。hrp可以使用dab作为氢供体,h2o2作为底物,最终产生棕黄色的抗原-抗体结合的产物。
二、碱性磷酸酶(ap)检测系统
dab在临床应用中也有局限性。当内源性过氧化物酶活性较高或黑色素含量较高时,dab不是最jia选择,应采用其他显色剂或碱性磷酸酶。例如,在黑色素瘤的免疫组化诊断中,dab显示的棕色沉淀物与黑色素瘤表达的hmb45(或s-100)在颜色上难以区分。如果黑色素颗粒较多,很难判断结果。因此,在富含黑色素的肿瘤中,使用红色着色剂有助于更清楚地确定阳性染色。ap系统使用固体红、固体蓝或bcip/nbt作为着色剂。固红染色阳性结果为红色,固蓝、bcip/nbt为蓝色。
ap
ap催化固体红显色反应,将萘酚as-mx磷酸水解为萘酚。萘酚与固体红发生偶联反应,在ap活性中心形成红色不溶性沉淀。苏木精免疫组化染色时,双染色系统固定效果较好。一是结合牢固,二是易于与dab和苏木精鉴别。
免疫组化双染技术的结果须建立在对阳性对照切片、阴性对照切片成立的基础上,进行染色结果的判读。更多有关免疫组化双染显色系统的相关产品,请联系北京百奥创新科技有限公司: