无血清细胞冻存液是一种用于细胞冻存和复苏的溶液,不含动物来源性蛋白,减少病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。它具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力的特点,适用于冻存各种动物及人的细胞系、原代细胞。无血清细胞冻存液可直接放置-80℃冰箱长期冷冻保存,无需经过费时的程序降温过程,省时、省力、省钱。此外,无血清细胞冻存液的成分明确,无批次间差异,通用型,适用于冻存各种细胞系,原代细胞。
使用无血清细胞冻存液进行细胞冻存时,建议遵循以下步骤:
将需要冻存的细胞悬浮在无血清细胞冻存液中,一般浓度为1-5×10^6个/ml。
将细胞悬液分装到无菌的冻存管中,每管1-2ml。
将冻存管放入-80℃冰箱中,进行长期冻存。
需要复苏时,将冻存管取出,迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动使其快速融化。
离心弃去上清夜,加入适量的培养基,轻轻摇动使细胞贴壁生长。
需要注意的是,无血清细胞冻存液虽然具有很多优点,但也存在一些局限性。例如,它不能微量、原位(如孔板)冻存,且价格相对较高。因此,在使用无血清细胞冻存液进行细胞冻存时,需要根据实际情况进行选择和操作。