高效液相色谱法测定生物发酵产品中成分腺苷的含量
本方法适用于虫草、菌粉、灵芝等产品系列发酵产品
1 仪器与试剂
1.1仪器
高效液相色谱仪( lc-500a) 配spd-500紫外检测器
n2000色谱工作站；
，十万分之一天平；
1.2试剂
腺苷对照品含量≥99.0
色谱纯甲醇，水为超纯水其他为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱 c18( 150 mm × 4.6 mm，5μm)
流动相：甲醇：磷酸盐缓冲液（ph 6.5） = 10：1
流速为1.0 ml /min
检测波长为260nm；柱温为室温；进样量为10 μl。
2.2 供试品溶液的制备
取拟青霉约1.0g，精密称定，置于50 ml 量瓶，加入20% 甲醇定容至50 ml，密塞，称定重量，超声20min，放至室温后称重，用甲醇补足减失的重量。用0. 45 μm 微孔滤膜滤过后供分析。
腺苷标准品谱图
拟青霉样品谱图
头孢菌样品谱图
3. 液相色谱仪器配置
pos
product number
qty
1
wk500-0102-002 lc-500a高压
1
2
wk500-1415-004 仪器启动工具包
1
3
wk500-0101-001 spd-500可变波长紫外检测器
1
4
wk500-0413-003 7725i手动进样阀　
1
5
wk500-0401-027 c18 柱 250*4.6
1
6
wk500-1106-002 溶剂托盘
1
7
wk500-0301-001 色谱工作软件　
1
8
样品前处理包
1
（超声波1台，真空泵1台，溶剂过滤器1套，
滤器、滤膜各2包）