低密度脂蛋白胆-固醇(ldl-c)测试盒的样本处理
（直接法分光光度计法）
一、试剂组成及配制:
二、测定步骤：
1、样本处理:
①、血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀
释后测定。
②、培养液样本：吸取培养液，1000转/分钟，离心10
分钟，取上清测定。
[注]：一般建议细胞密度在100万个/ml以上。
③、组织样本：准确称取组织重量,按重量(g)：体积
(ml)=1：9的比例，加入9倍体积的匀浆
介质，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/
分，离心10分钟，取上清液待测。
[注]:1、如组织样本为非高脂样本，匀浆介质统一用磷酸
盐缓冲液(0.1mol/l ph 7.4)或生理盐水进行提取。
2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆
介质可统一用无水乙醇进行提取。
④、细胞样本：
a、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000转/
分，离心10分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用
等渗缓冲液（推荐0.1mol/l、ph7～7.4磷酸盐
缓冲液）清洗1～2次，同样1000转/分，离心
10分钟，弃上清液，留细胞沉淀；
b、细胞破碎:加入0.2～0.3ml的匀浆介质（推荐
0.1mol/l、ph7～7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水）
进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率：300w，
3～5秒/次，间隔30秒，重复3～5次)或手动匀
浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采
用裂解液裂解(推荐tritonx-100，1～2%，裂解
30～40分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。
[注]：一般建议细胞密度在100万个/ml以上。破碎好的
液体可显微镜观察细胞是否破碎
低密度脂蛋白胆-固醇(ldl-c)测试盒的样本处理
关键词：分光光度计 显微镜