丁酰胆-碱酯酶(b-che)测定试剂盒的操作过程
（比色法）
一、测定原理：
丁酰胆-碱酯酶水解丁酰胆-碱生成胆-碱及乙酸，胆-碱可以与巯基显色剂反应生成tnb黄色化合物，根据
颜色深浅进行比色定量，水解产物胆-碱的数量可以反应胆-碱酯酶的活力。
二、试剂组成及配制(50t/24样)：
试剂一：标准品，粉剂×3支，4℃保存。
1μmol/ml标准品应用液的配制：取标准品一支加生理盐水10ml混匀，现用现配。
试剂二：底物粉剂×2支，用时每支粉剂加生理盐水20ml，现用现配，配好后4℃保存两周。
试剂三：显色剂贮备液，3ml×1支，4℃保存，用时以生理盐水1︰9稀释，配成显色应
用液。需多少配多少，也可以一次配成30ml，避光冷藏。保存期3个月。
试剂四：抑制剂，液体×1支。打开后可以装在空的小塑料瓶内（附空瓶一只），室温保存。
试剂五：透明剂，液体6ml×1支。室温保存。
生理盐水：60ml×2瓶，室温保存。
三、操作过程：
1、样本前处理：
组织样本:准确称取组织重量,按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例,加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下
机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清，即为10%匀浆上清液;
血清样本：取抗凝全血1000～1500转/分钟，离心10分钟，取上层血浆。也可测血清，测时将血清(浆)
用生理盐水1︰19稀释；
全血样本：取0.1ml抗凝全血加生理盐水至10ml按1︰99稀释，取a ml(一般取0.1ml)检测，每个样本
取样前必须充分混匀。
3、参考取样量：
①、大鼠血清测试前用生理盐水20倍稀释，参考取样量为30～50μl。
②、10%脑组织匀浆的参考取样量为30～50μl。
③、1︰99稀释后的全血稀释液取0.1ml。
五、本法优点：
1、灵敏度高。微量样品即可测出丁酰胆-碱酯酶的水平。
2、可以分型。另有配套试剂盒可测乙酰胆-碱酯酶。
3、方法简便快速，准确稳定。
4、不需气相色谱等高级仪器，只要一般分光光度计即可。
丁酰胆-碱酯酶(b-che)测定试剂盒的操作过程
关键词：分光光度计