缓冲液是弱酸与其共轭碱、或者弱碱与其共轭酸的溶液。在分析化学应用中，如果样品包含酸性或碱性官能团，反相高效液相色谱(rp-hplc)通常会使用缓冲液。这类缓冲液可减轻氢/水合氢和氢氧根离子的影响，从而降低ph波动。
流动相缓冲液基于缓冲类型、离子强度和ph正确选择缓冲液，是离子分析物rp-hplc方法开发最关键的步骤。rp-hplc中离子分析物的保留率主要受流动相ph影响。因此，rp-hplc流动相ph控制是确保分析物有效分离最重要的参数之一。
二氧化硅类色谱柱反相分离常用ph值范围为2到8。此外，由于缓冲液在其pka值下的ph控制效果佳，故其pka必须接近所需的ph值。一般来说，最好选择 pka 值小于所需流动相 ph 值 2 个单位的缓冲液。我们提供各种 ph 值范围的 hplc 级缓冲液，可满足您实验室的所有色谱应用需求。
hplc缓冲液选择考量因素化学纯度hplc实验所用流动相添加剂（缓冲液、盐、酸和碱）及有机溶剂质量必须适合检测器灵敏度和洗脱方案。为实现理想的色谱分离效果，建议使用高质量溶剂和试剂。
化学相容性必须根据色谱柱外壳材料和固定相性质选择缓冲液组成及流动相ph值，避免损坏色谱柱硬件和柱床。
缓冲液溶解性缓冲液好溶于水且不会沉淀。将缓冲液与有机溶剂混合时，必须谨慎选择缓冲液浓度，避免因浓度过高而形成沉淀。否则可能造成泵运行问题，引起hplc色谱柱堵塞。
缓冲强度与固定相相互作用弱的洗脱液今可从色谱柱上洗脱弱吸附分析物，而强相互作用洗脱液则可洗脱强吸附样品分子。不同溶剂的洗脱或溶剂强度主要取决于所用固定相的类型。除洗脱强度之外，缓冲液粘度和紫外线吸收率也对hplc分析适用性存在重要影响。