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小鼠5核苷酸酶elisa检测试剂盒操作步骤

小鼠5核苷酸酶elisa检测试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
小鼠血管紧张素转化酶(mouse ace)
小鼠雄激素结合蛋白(mouse abp)
小鼠促肾上腺皮质激素(mouse acth)
小鼠active caspase-3
小鼠active caspase-7
小鼠active caspase-8
小鼠激活素a(mouse activin a)
小鼠脂联素(mouse adiponectin)
小鼠抗线粒体抗体(mouse ama)
小鼠抗核抗体(mouse ana)
小鼠血管紧张素ii(mouse ang ii)
小鼠血管生成素-2(mouse angiopoietin-2)
小鼠心钠素(mouse anp)
小鼠凋亡诱导因子(mouse aif)
小鼠抗利尿激素/血管加压素(mouse avp/adh)
小鼠醛固酮(mouse ald)
小鼠白蛋白(mouse albumin)
小鼠血管抑素(mouse angiostatin)
小鼠载脂蛋白e(mouse apo e)
小鼠b淋巴细胞刺激因子(mouse baff)
小鼠凋亡因子bax(mouse bax)
小鼠细胞凋亡相关基因(mouse bcl-2)
其它类似信息

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