小麦是*二大粮食作物，仅次于玉米，作为人类主食之一，对于小麦的研究由来已久。现在利用现代分子生物学手段改良小麦种子,另外由于现今转基因植物的广泛应用以及外来生物入侵，海关检验检疫部门对于转基因，病虫害检测方面也需要一些快速的检测手段。
omega bio-tek seed direct pcr kit 能够快速，准确，，安全的从各种干燥或者新鲜植物种子中制备高质量的基因组 dna 用于快速的 pcr 检测，特别适合各种高通量快速检测实验。
方案一：
特点：*不用离心和研磨操作，也不用长时间浸泡种子，只需将一粒完整的种子在裂解液中消化 1-2 小时即可以用来 pcr 检测。
一、 材料：新鲜或者放置不超过一年的小麦种子样品
二、方法：
1、取 1 粒小麦种子放入 2ml 离心管中，加入 95ul ps1 和 5ul ps2，56℃水浴 1-2 小时。
2、将样品置于 90℃水浴 5min，冷却后加入 100ul ps3，短暂涡旋 20 秒。所得抽提液可直接作为 pcr 反应的模板。
注：如果样品较多，可以先将 ps1 和 ps2 按比例混合，再分装到每个样品管中。客户也可以使用 pcr 管或者 96 孔 pcr 板代替 2ml 离心管，直接在 pcr 仪上加热。
三、结果：
1、取 5ul e.z.n.a. seed direct pcr kit 抽提的 dna 作为 50ul 体系 pcr 扩增的模板，以植物 its1 为目标基因（上游引物：5’-agaaatcgtaacaaggtttccgtagg-3’, 下游引物：5’-tctccgcttattgatatgc-3’），omega 2×taq master mix 35 个循环扩增约 650bp 左右的片段，取 10% pcr 产物 1.5%琼脂糖凝胶电泳结果如下。结果表明，使用 e.z.n.a. seed direct pcr kit 抽提得到的基因组 dna *可以用于 pcr 反应，扩增出来的目的条带清晰，大小一致。 m：200bp dna marker c1： 阳性对照（一粒干燥的小麦种子使用 e.z.n.a.plant dna mini kit 抽提后，用 100ul elution buffer 洗脱，取 3ul 作为 pcr 反应的模板）； c2：阴性对照（用灭菌双蒸水作为模板） 1-45：不同小麦种子样品
2、取 5ul e.z.n.a. seed direct pcr kit 抽提的 dna 作为 50ul 体系 pcr 扩增的模板，以小麦 alpha-type gliadin 为目标基因（上游引物：5’- agacctttctcatccttgcc-3’,下游引物：5’- ttccttatttcctcgaactgg-3’）， omega 2×taq master mix 35 个循环扩增 766bp 的片段，取 16% pcr 产物 1.5%琼脂糖凝胶电泳结果如下。结果表明，使用 e.z.n.a. seed direct pcr kit 抽提得到的基因组 dna *可以用于 pcr 反应，扩增出来的目的条带清晰，大小一致。m：dl2000 dna marker c2：阴性对照（用灭菌双蒸水作为模板） 1-8：八粒小麦种子