目的筛选具有提高神经内肽酶(nep)活性从而降低神经细胞β-淀粉样肽(aβ)水平的药物,为临床治疗阿尔茨海默症(ad)提供实验依据。方法以脂质体lipofectaminetm2000介导瑞典突变型淀粉样肽前体蛋白(sweapp)表达质粒pcdna3.1-sweapp转染神经母细胞瘤细胞sk-n-sh,g418筛选获得稳定表达细胞株作为ad模型细胞,采用蛋白印迹技术检测sweapp表达情况,酶联免疫吸附试验(elisa)检测细胞培养基中a4β0和a4β2含量变化,进而以mtt法检测各天然药物对sk-n-sh细胞增殖能力的影响,确定药物的有效浓度及最佳作用时间,以nep肽酶实验检测药物对nep酶活性影响,elisa法检测药物对aβ水平的影响。结果western blot结果显示,转染后sk-n-sh细胞高表达sweapp蛋白;elisa结果显示,转染后的sk-n-sh细胞分泌a4β0、a4β2明显升高,分别为转染前的7.26和3.27倍(p<0.05)。nep肽酶实验检测结果显示,茶多酚、人参皂苷rb1、rg3能够明显提高nep酶活性,分别为(117±2.8)%(、131±4.0)%和(121±1.6)%。eli...完成机构:山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所 山东大学附属济南市中心医院