您好,欢迎访问一九零五行业门户网

用抗人抗体包被微珠

[器材和试剂]
● 磁珠(dynabeads m-450,甲苯磺酰活化,dynal)
● 硼酸盐缓冲液(50mmol/l硼酸钠,ph 9.5)
每 抗人fc多克隆抗体(免疫纯的羊抗人igg fc片段特异性抗体,pierce)
● 磁分离器(dynal)
● pbs(磷酸盐缓冲液: 2mmol/l nah2po4 h20, 16mmol/l na2hpo4·2h20, 15mmol/l nacl)
● pbbs (pbs, 0.1%bsa)
● 硫柳汞(sigma)
[方法]
1.将500ul已充分混悬的磁珠转移到1支eppendorf管中。将该管置于磁分离仪中,除去液体。
2.将磁珠悬浮于1m1硼酸盐缓冲液中,混合,再如上除去上清液。
3.将磁珠悬浮在含有75ug抗人fc特异性多克隆抗体的硼酸盐缓冲液中,定容到1m1;在转轮上,室温孵育24h。
4.用磁分离仪去除上清液,将磁珠转移到一个含10mlpbbs的falcon管中。4℃旋转洗涤磁珠,10分钟1次,30分钟3次,过夜。每次洗涤后,将含有磁珠的试管插入合适的磁分离仪中除去上清。
5.已包被的磁珠储存在4℃(加0.05%的硫柳汞)。如果需长期储存(超过2周),使用前应将磁珠用10mlpbbs洗涤3遍(每次5分钟)。
其它类似信息

推荐信息