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其它elisa免疫检测试剂盒的其操作程序

其它elisa免疫检测试剂盒前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。酶联免疫吸附试验:是酶免疫测定技术中应用z广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
1、阻断elisa试剂盒
本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(tge)、猪伪狂犬病(pr)及猪胸膜肺炎(ap)的主要检测方法。
下面以ap2型抗体的阻断elisa试剂盒检测法为例介绍:
① 100μl ap2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
④ 加100μl工作量兔抗ap2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
⑤ 加100μl工作量猪抗兔igg-hrp → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
⑥ 加100μl opd底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液
⑦ 用elisa检测仪测定od值。
2、竞争elisa试剂盒:此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。
其基本程序为:
① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液
④ 用elisa试剂盒检测仪测定od值。
被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定,如果待检溶液中抗原越多,被结合的标记抗原的量就越少,有色产物就减少,这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特异性高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测;其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记,而且因为抗原的结构不同,还需应用不同的结合方法。此外试验中应用酶标抗原的量较多。
本试验同时设标准阴、其它elisa免疫检测试剂盒阳性血清对照、兔抗ap2型阳性对照、空白对照。
对照品 隐丹参酮 20mg 对照品
对照品 原阿片碱 20mg 对照品
对照品 脱水*内酯 20mg 对照品
对照品 丹参素钠 20mg 对照品
对照品 * 20mg 对照品
对照品 五味子醇甲 20mg 对照品
对照品 虫草素 20mg 对照品
对照品 湖贝甲素 20mg 对照品
对照品 异鼠李素 20mg 对照品
其它elisa免疫检测试剂盒
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