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制备色谱填充柱方法

制备填充柱操作过程:1)把空柱竖直架在滴定架上,两头向上,夹紧。2)色谱柱有两种,一种是两头一样长的,另一种是两头一长一短的,两头一样长的在填充时不分方向,而两头一长一短的则有方向性,长的一端接进样口,短的一端接检测器;装柱前要将小三角漏斗接在进样口的一端;用10cm长的软橡胶管将柱和漏斗套在一同,留意要套得紧一些,避免参加载体时会外泄。3)将玻璃棉捏成2cm长的一条(不用捏的太小),塞入空柱接检测器一端,深度为5-10cm。4)把约50cm长的硅橡胶管(一般橡胶管也行,但作用略差)一头接在抽气机上(套上一层纱布以避免填料被抽入抽气机内),另一头挡在空柱接检测器一端。5)在小漏斗里参加少量填料(1-2ml),用橡胶棒悄悄敲击空柱使载体落入柱管中,开动抽气机1-2s再关闭,使这少量载体快速到达玻璃棉部位并构成有用阻塞。6)一边继续开动抽气机,一边在漏斗里参加填料,并慢慢敲击柱的不同方位,使填料尽量严密;根本填满时细心敲击柱,填料紧缩一点就再参加一点,直至再无法严密停止;如果是玻璃珠,最终填满的方位能够和检测器端的玻璃棉方位相平,如果是不锈钢柱,则两头都填满至端口。7)拔掉进样口端的小漏斗,参加一条玻璃棉,塞紧。8)如果是玻璃柱,要先在两头各套上一个胶圈,避免螺母落下时打碎柱。9)在柱上做符号后(引荐挂金属小牌),装入柱温箱中老化。留意事项:如果是玻璃柱,在操作中要当心折断。但是玻璃柱由所以通明的,能够看到填充作用;不锈钢柱尽管不会折断,但是在填充时看不到作用,只能凭经历填满停止。涂固定液时应当留意涂渍均匀,要常常搅动溶液但要轻盈,不要损坏载体。老化时要留意保持低的载气流速,逐步升温,老化要充沛,这样才干到达较好的柱效。
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